変性尿素ポリアクリルアミドゲル電気泳動は、一本鎖DNAを分離または500ヌクレオチドの上限に達した時点でRNAに使用されます。熱変性サンプルと非構造化一本鎖との組み合わせで尿素は、その分子量に応じてゲルマトリックス内に移行する。
尿素PAGEまたは変性尿素ポリアクリルアミドゲル電気泳動では、二次的DNAまたはRNAの構造を変性し、分子量に基づいて、ポリアクリルアミドゲルマトリックス中のそれらの分離に使用される6月8日Mの尿素を、採用しています。 2から500塩基間のフラグメントは、単一のヌクレオチドのような小さな長さの違いが、この方法1を用いて分離することができます。サンプルの移行は、選択されたアクリルアミドの濃度に依存する。ポリアクリルアミドの割合は低分子量のフラグメントを解消します。ゲルの実行中に尿素や45〜55 ° Cの温度の組み合わせは、非構造化DNAまたはRNA分子を分離することができます。
一般的にはこの方法は、一本鎖DNAまたはRNAの断片を、酵素的切断反応から次のような合成または標識オリゴヌクレオチドまたは製品を分析したり、精製するために必要です。
このビデオの記事では、変性尿素ポリアクリルアミドゲルを準備して実行する方法を示します。技術的なヒントは、元のプロトコルの1,2に加えて、含まれています。
The authors have nothing to disclose.
この作品は、シンガポール学術研究評議会(ARC)[承認番号90/07]によってサポートされていました。我々は、サポートのための放射線抵抗性細菌に感謝。