महाधमनी अँगूठी परख
Summary
Angiogenesis, पूर्व मौजूदा vasculature से रक्त वाहिकाओं के अंकुरण, दोनों प्राकृतिक और रोग प्रक्रियाओं के साथ जुड़ा हुआ है. यहाँ हम एक महाधमनी अंगूठी परख है कि angiogenic potentiators और inhibitors के सीधे संस्कृति में महाधमनी के छल्ले को जोडी देता प्रदर्शित करता है. अंकुरित और neovessel परिणाम 6-12 दिनों की अवधि में महाधमनी के छल्ले निरीक्षण द्वारा निर्धारित किया जा सकता है है.
Abstract
Angiogenesis, preexisting vasculature से रक्त वाहिकाओं के अंकुरण दोनों प्राकृतिक और रोग प्रक्रियाओं के साथ जुड़ा हुआ है. विभिन्न angiogenesis assays संस्कृति शर्तों (1) में व्यक्तिगत endothelial कोशिकाओं का अध्ययन शामिल है. महाधमनी अंगूठी परख एक angiogenesis के मॉडल है कि अंग संस्कृति पर आधारित है. इस परख में, angiogenic वाहिकाओं महाधमनी ((2) से संशोधित) के खंड से बढ़ता है. संक्षेप में, माउस वक्ष महाधमनी excised है, वसा परत और adventitia निकाल रहे हैं, और लंबाई में लगभग 1 मिमी के छल्ले तैयार हैं. व्यक्तिगत छल्ले तब तहखाने मैट्रिक्स (BME) निकालने, 48 अच्छी तरह से एक थाली के अलग – अलग कुओं के अंदर डाली के एक छोटे से ठोस गुंबद में एम्बेडेड रहे हैं. Angiogenic कारकों और के angiogenesis inhibitors के छल्ले को सीधे जोड़ा जा सकता है, और महाधमनी के छल्ले और अन्य प्रकार की कोशिकाओं के एक मिश्रित संस्कृति सह paracrine angiogenic प्रभाव के अध्ययन के लिए नियोजित किया जा सकता है. अंकुरित निरीक्षण stereomicroscope के तहत 6-12 दिनों की अवधि में मनाया जाता है. बड़े 6-plicates महाधमनी क्षेत्रों, प्रयोग में अनियमितताओं की वजह से भिन्नता के कारण जोरदार की सलाह दी है. Neovessel परिणाम प्रयोग और imaged चरण माइक्रोस्कोपी का उपयोग के दौरान निगरानी की है, और supernatants प्रासंगिक angiogenic और विरोधी angiogenic कारकों, कोशिका मृत्यु मार्करों और नाइट्राइट की माप के लिए एकत्र कर रहे हैं.
Protocol
Discussion
महाधमनी अंगूठी परख angiogenic के रूप में विरोधी angiogenic कारकों के रूप में अच्छी तरह से मूल्यांकन करने के लिए अपने रास्ते पर एक लाभदायक उपकरण है. वाहिकाओं है कि महाधमनी के छल्ले भर्ती चिकनी मांसपेशियों की कोशिका?…
Referências
- Goodwin, A. M. In vitro assays of angiogenesis for assessment of angiogenic and anti-angiogenic agents. Microvascular Research. 74, 172-183 (2007).
- Masson, V., Devy, L., Grignet-Debrus, C., Bernt, S., Bajou, K., Blacher, S., Roland, G., Chang, Y., Fong, T., Carmeliet, P., Foidart, J. M., Noel, A. Mouse aortic ring assay: a new approach of the molecular genetics of angiogenesis. Biol. Proced. Online. 4, 24-31 (2002).
