Summary

主动脉环含量

Published: November 24, 2009
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Summary

血管生成,从预先存在的血管的血管的萌芽,是与自然和病理过程中。在这里,我们展示了一个主动脉环实验允许的血管生成potentiators和抑制剂可直接添加到文化的主动脉环。发芽和neovessel产物,可以通过检查为期6-12天的主动脉环确定。

Abstract

血管生成,从先前存在的血管血管发芽与自然和病理过程。各种血管生成的实验涉及个别内皮细胞在培养条件(1)的研究。主动脉环实验是一种血管生成模型,器官培养的基础上。在这个实验中,血管生成血管生长的主动脉(从(2)修改)段。简言之,小鼠胸主动脉切除,脂肪层和外膜被删除,并准备戒指约1毫米长。然后嵌入在一个小的坚实的圆顶地下室矩阵提取物(BME)的48孔板个别水井内投,个人环。血管生成因子和血管生成抑制剂,可直接添加到戒指,和主动脉环和其他类型的细胞混合共培养可以旁分泌的血管生成影响的研究工作。发芽立体显微镜下观察期6-12天检查。由于大的变化,在主动脉段,实验的违规行为造成6 plicates,强烈建议。 Neovessel生长监测整个实验过程,并用相差显微镜成像,以及相关的血管生成和抗血管生成因子,细胞死亡标记和亚硝酸盐的测量收集上清。

Protocol

前一天的实验: 允许BME(生长因子减少,Cultrex,Trevigen)解冻在冰上或4 ° C,一旦解冻保持在冰上,以防止重新巩固。 日实验: 小鼠(6-7周龄)是麻醉和流血。 到冷无菌PBS填充培养皿中取出胸主动脉。 从周围的脂肪组织进行机械清洗。注意,避免在任何时间干燥主动脉。 使用手术刀片,片主动脉平均为1毫米的戒指。必须是统一的,…

Discussion

主动脉环实验的方式,以评估血管生成以及抗血管生成的因素是一个有益的工具。主动脉环招聘平滑肌细胞和周细胞生长的关联与内皮细胞管,这意味着它们在体内neovessels解剖学类似的船只。此外,小鼠主动脉环实验,认为对这一物种的基因工具繁多的优势。然而,有几个缺点主动脉环检测。首先, 在体内的血管生长发生微血管和大血管,如主动脉。其次,在处理环不一致和周围?…

Referências

  1. Goodwin, A. M. In vitro assays of angiogenesis for assessment of angiogenic and anti-angiogenic agents. Microvascular Research. 74, 172-183 (2007).
  2. Masson, V., Devy, L., Grignet-Debrus, C., Bernt, S., Bajou, K., Blacher, S., Roland, G., Chang, Y., Fong, T., Carmeliet, P., Foidart, J. M., Noel, A. Mouse aortic ring assay: a new approach of the molecular genetics of angiogenesis. Biol. Proced. Online. 4, 24-31 (2002).
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Citar este artigo
Bellacen, K., Lewis, E. C. Aortic Ring Assay. J. Vis. Exp. (33), e1564, doi:10.3791/1564 (2009).

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