Assemblea, Tuning e utilizzo di un microscopio Apertureless Near Field Infrared for Imaging Proteine
Summary
L'assemblaggio di un microscopio a raggi infrarossi per nearfield aggregati proteici di imaging è descritto.
Abstract
Questo lavoro si propone di istruire il lettore nel montaggio e funzionamento di un vicino infrarosso microscopio a campo per l'imaging oltre il limite di diffrazione. Il apertureless microscopio a campo vicino è una luce scattering-tipo di strumento che fornisce gli spettri infrarossi a circa 20 nm risoluzione. Un elenco completo dei componenti e uno step-by-step del protocollo per l'uso è fornito. Gli errori più comuni in assemblea e messa a punto dello strumento sono discussi. Un insieme rappresentativo di dati che mostra la struttura secondaria di fibrille amiloidi è presentato.
Protocol
Di fondo: Apertureless sonda di campo vicino microscopia IR offre immagini ad alta risoluzione spaziale. Si tratta di una tecnica relativamente nuova, in cui è diffusa un fascio incidente a infrarossi da un forte microscopia a forza atomica (AFM) punta oscilla alla frequenza di risonanza del cantilever vicino al campione. Un rivelatore IR raccoglie la luce diffusa ed è demodulato a questa frequenza di risonanza o sue armoniche. In questo modo, la dispersione sfondo della vicenda fascio laser…
Acknowledgements
Noi riconosciamo con gratitudine NSF, NSERC, NIH, e ONR.
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Citar este artigo
Paulite, M., Fakhraai, Z., Akhremitchev, B. B., Mueller, K., Walker, G. C. Assembly, Tuning and Use of an Apertureless Near Field Infrared Microscope for Protein Imaging. J. Vis. Exp. (33), e1581, doi:10.3791/1581 (2009).