Kurul, Tuning ve Protein Görüntüleme için bir Apertureless Yakın Alan Kızılötesi Mikroskop Kullanımı
Summary
Görüntüleme protein büyüklükler bir nearfield kızılötesi mikroskop montaj açıklanmıştır.
Abstract
Bu kağıt kırınım sınır ötesinde görüntüleme için bir kızılötesi yakın alan mikroskobu montajı ve işletilmesi okuyucu öğretmeyi hedefliyor. Apertureless yakın alan mikroskobu, yaklaşık 20 nm çözünürlükte infrared spektrumları sağlayan bir ışık saçılması tipi araçtır. Bileşenler ve kullanımı için bir adım-adım protokolü tam bir listesi verilir. Genel hatalar, montaj ve enstrüman ayar tartışılmıştır. Bir amiloid fibril ikincil yapısını gösteren bir temsilci veri seti sunulmaktadır.
Protocol
Amaç: Apertureless prob yakın alan IR mikroskopi yüksek uzaysal çözünürlüklü görüntüleme sunar. Bu olay bir kızılötesi ışın yakın örnek konsol rezonans frekansta salınan keskin bir atomik kuvvet mikroskobu (AFM) ucu tarafından dağınık olduğu nispeten yeni bir tekniktir. IR dedektörü dağınık ışık toplar ve bu rezonans frekansı ya da harmonikler demodüle. Bu şekilde, numune yüzeyinden geri kalanı üzerinde odaklanmış bir lazer ışını olayın arka plan …
Acknowledgements
Biz minnetle NSF, NSERC, NIH ve ONR kabul etmiş sayılırsınız.
Referências
- Mueller, K., Yang, X., Paulite, M., Fakhraai, Z., Gunari, N., Walker, G. C. Chemical imaging of the surface of self-assembled polystyrene-b-poly(methyl methacrylate) diblock copolymer films using apertureless near-field IR microscopy. Langmuir. 24, 6946-6951 (2008).
- Lahrech, A., Bachelot, R., Gleyzes, P., Boccara, A. C. Infrared-reflection-mode near-field microscopy using an apertureless probe with a resolution of lambda/600. Opt. Lett. 21, 1315-1317 (1996).
- Taubner, T., Hillenbrand, R., Keilmann, F. Performance of visible and mid-infrared scattering-type near-field optical microscopes. J. Microsc. 210, 311-314 (2003).
- Kim, Z. H., Leone, S. R. Polarization-selective mapping of near-field intensity and phase around gold nanoparticles using apertureless near-field microscopy. Optics Express. 16, 1733-1741 (2008).
- Bridger, P. M., McGill, T. C. Observation of nanometer-scale optical property discrimination by use of a near-field scanning apertureless microscope. Opt. Lett. 24, 1005-1007 (1999).
- Stebounova, L., Akhremitchev, B. B., Walker, G. C. Enhancement of the weak scattered signal in apertureless near-field scanning infrared microscopy. Rev. Sci. Instrum. 74, 3670-3674 (2003).
- Akhremitchev, B. B., Pollack, S., Walker, G. C. Apertureless Scanning Near-Field Infrared Microscopy of a Rough Polymeric Surface. Langmuir. 17, 2774-2781 (2001).
- Hecht, B., Bielefeldt, H., Inouye, Y., Pohl, D. W., Novotny, L. Facts and Artifacts in Scanning Near-Field Optical Microscopy. J. Appl. Phys. 81, 2492-2498 (1997).
- Labardi, M., Patane, S., Allegrini, M. Artifact-free near-field optical imaging by apertureless microscopy. Appl. Phys. Lett. 77, 621-623 (2000).
- Palanker, D. V., Simanovskii, D. M., Huie, P., Smith, T. I. On Contrast Parameters and Topographic Artifacts in Near-Field Infrared Microscopy. J. Appl. Phys. 88, 6808-6814 (2000).
- Akhremitchev, B. B., Sun, Y., Stebounova, L., Walker, G. C. . Monolayer-Sensitive Infrared Imaging of DNA Stripes Using Apertureless Near-Field Microscopy.Langmuir. 18, 5325-5328 (2002).
- Brehm, M., Taubner, T., Hillenbrand, R., Keilmann, F. Infrared Spectroscopic Mapping of Single Nanoparticles and Viruses at Nanoscale Resolution. Nano Lett. 7, 1307-1310 (2006).
- Dazzi, A., Prazeres, R., Glotin, F., Ortega, J. M. Analysis of nano-chemical mapping performed by an AFM-based (“AFMIR”) acousto-optic technique. Ultramicroscopy. 107, 1194-1200 (2007).
- Yang, D. S., Yip, C. M., Huang, T. H. J., Chakrabartty, A., Fraser, P. E. Manipulating the Amyloid-β Aggregation Pathway with Chemical Chaperones. J. Biol. Chem. 274, 32970-32974 (1999).
- Meadows, P. Y., Walker, G. C. Force Microscopy Studies of Fibronectin Adsorption and Subsequent Cellular Adhesion to Substrates with Well-Defined Surface Chemistries. Langmuir. 21, 4096-4107 (2005).
Citar este artigo
Paulite, M., Fakhraai, Z., Akhremitchev, B. B., Mueller, K., Walker, G. C. Assembly, Tuning and Use of an Apertureless Near Field Infrared Microscope for Protein Imaging. J. Vis. Exp. (33), e1581, doi:10.3791/1581 (2009).