Summary

השתלה של מח כליות שלמים דג הזברה למבוגרים

Published: February 25, 2007
doi:

Summary

Abstract

בתאי גזע hematopoietic (HSC) הם אוכלוסייה נדירה של תאים pluripotent כי לשמור את כל שושלות דם מובחנים לאורך החיים של אורגניזם. ההגדרה הפונקציונלית של HSC הוא תא מושתלים שיש לו את היכולת לשחזר את כל שושלות דם של המונח הנמען מוקרן ארוך. הגדרה זו הוקמה על ידי עשרות שנות עבודה הזרע במערכות יונקים. באמצעות השתלת תאים hematopoietic (HCT) ו מניפולציות גנטיות הפוך העכבר, גורמי הרגולציה הבסיסית של הביולוגיה HSC מתחילים להיות חשפה, אבל עדיין ברובו מתחת נחקרו. לאחרונה, דג הזברה התפתחה כמודל גנטי חזק ללמוד hematopoiesis החולייתנים. הקמת HCT של דג הזברה יאפשר למדענים להשתמש בקנה מידה גדול מתודולוגיות סריקות גנטיות וכימיות זמין דג הזברה לחשוף את המנגנונים שבבסיס הרומן תקנה HSC. במאמר זה, אנחנו מדגימים את השיטה לביצוע HCT של דג הזברה מבוגר. אנחנו מראים את הנתיחה והכנת מוח דג הזברה הכליה כולה, באתר של hematopoiesis הבוגרת דג הזברה, לבין המבוא של תאים אלה תורם למחזור של דגים הנמען מוקרן באמצעות הזרקה intracardiac. בנוסף, אנו מתארים את הטיפול לאחר השתלה של דגים "טיפול נמרץ" כדי להגדיל את הבריאות לטווח הארוך. בכל טיפול, כללי עדין של הדג לפני, במהלך, ואחרי ההשתלה הוא קריטי כדי להגדיל את מספר הדגים ישרדו יותר מפעם אחת בחודש הבא את ההליך, שהוא חיוני להערכת לטווח ארוך (<3 חודשים) engraftment. נתוני הניסוי לצורך הקמת בפרוטוקול זה יפורסם במקום אחר. הקמתה של פרוטוקול זה יאפשר המיזוג בקנה מידה גדול דג הזברה גנטיקה וביולוגיה להשתלה.

Protocol

הקרנה WT מקרינים דגים 25Gy 2 ימים לפני ההשתלה כליה לנתיחה הקורבן המספר המתאים של תורמים ניאון tricaine (~ 100 מ"ל 4mg/ml Tricaine / ליטר מים וד?…
check_url/pt/159?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
LeBlanc, J., Venezia Bowman, T., Zon, L. Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (2), e159, doi:10.3791/159 (2007).

View Video