Transplantation av hela Njure Marrow i vuxen Zebrafish
Summary
Abstract
Hematopoetiska stamceller (HSC) är en sällsynt population av pluripotenta celler som underhålla alla de differentierade blodet linjerna under hela livet i en organism. Den funktionella definitionen av en HSC är ett transplanterat celler som har förmågan att rekonstruera allt blodet linjerna av en bestrålad mottagare lång sikt. Denna beteckning grundades av decennier av banbrytande arbete i däggdjur system. Använda hematopoietisk cell transplantation (HCT) och omvänd genetiska manipulationer i musen, är de bakomliggande reglerande faktorer av HSC biologi börjar bli avslöjade, men är fortfarande till stor del underprospekterat. Nyligen har zebrafisk visat sig vara en kraftfull genetisk modell för att studera ryggradsdjur blodbildningen. Etablera HCT i zebrafisk kommer att tillåta forskare att utnyttja storskaliga genetiska och kemisk screening metoder tillgängliga i zebrafisk att avslöja nya mekanismerna bakom HSC reglering. I den här artikeln visar vi en metod för att utföra HCT hos vuxna zebrafisk. Vi visar dissekering och beredning av zebrafisk hela njure märg, platsen för vuxna blodbildningen i zebrafisk, och införandet av dessa givare celler i cirkulationen av bestrålade mottagarens fisk via intrakardiell injektion. Dessutom beskriver vi efter transplantation vård av fisk i en "IVA" för att öka deras långsiktiga hälsa. I allmänhet milda hand om fisken innan, under och efter transplantationen är avgörande för att öka antalet fiskar som överlever mer än en månad efter den procedur, som är väsentlig för bedömning av de långsiktiga (<3 månader) engraftment. Den experimentella data används för att upprätta detta protokoll kommer att publiceras någon annanstans. Inrättandet av detta protokoll kommer att möjliggöra en sammanslagning av storskaliga zebrafisk genetik och transplantation biologi.
