Dextran의 황산 나트륨 (DSS)를 사용 Murine 대장염 모델링
Summary
식수에서 실시 Dextran 황산 나트륨 (DSS)은 급성 대장염의 설립 murine 염증성 손상 모델입니다. 이 프로토콜은 DSS 치료와 조직의 준비를 위해 방법을 설명합니다.
Abstract
– Crohn의 대장염 궤양성 대장염 특히 및 Crohn의 질병의 colonic 변종, 대장염은 바이러스 또는 박테리아 감염, 허혈성 모욕, 또는자가 면역 질환에서 발생할 수 있습니다. 급성 대장염은 복부 통증과 팽창, 흡수 장애, 설사, hematochezia 및 배설물에 점액과 함께 제공됩니다. 우리는 환경, 유전 및 대장염의 염증성 장 질환과 동물 모델에서 상피 장벽 부전이 질병의 우리의 이해를 발전에 필수되었습니다 사이의 복잡한 상호 작용을 이해하기 시작하고 있습니다. 하나의 인기있는 모델은 몇 일 지속 상피 손상과 콜론의 강력한 염증 반응의 결과로, 낮은 분자량 Dextran 나트륨 황산 (DSS)와 생쥐의 식수를 보충 포함<sup> 1</sup이 방법의>. 유사 급성 부상, 수리 뒤에 급성 부상 및 복구 모델링 만성 염증성 질환과 interspersed DSS의 반복주기를 모델로 사용할 수 있습니다<sup> 2</sup>. 식수의 3 % DSS의 단일 4 일간 치료 후, 마우스는 체중 감소, 피가 stools, 그리고 설사를 포함한 급성 대장염의 흔적을 보여줍니다. 생쥐는 치료 과정의 결론에 euthanized하고 검시 해부 콜론에서 처리하고 '스위스'압연 수 있습니다<sup> 3</sup> 전체 대장의 미세 분석을 허용하거나 매크로 분석을 허용하는 "소시지"로 포르말린과 함께 들어갈 수 있습니다. 조직은 다음 sectioned 파라핀에 내장하고, histologic 검토를 위해 얼룩이다.
Protocol
Discussion
이 프로토콜은 급성 부상, 부상 – 수리, 또는 만성 colonic 부상 프로세스를 모델로 수정할 수 있습니다.
급성 상해 변경 :
즉각적인 희생 뒤에 4~6일에 대한 DSS 처리 광고 lib과
상해 – 수리 수정 :
3-4일과 희생의 복구 기간 (위의 프로토콜에서 설명) 다음 DSS 치료 4-6일로 부상.
만성 대장염의 변경 : </p…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIH (1 K08 DK080221 – 01)와 밴더빌트 기관 개발 기금에서 제공하는 자금.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Dextran Sulfate Sodium Salt | USB Corp | 9011-18-1 | mol wt 40,000-50,000 | |
| 10% Buffered Formalin Phosphate | Fisher Scientific | SF100-4 | ||
| Isoflurane, USP | Phoenix Pharmaceuticals | NDC 57319-474-06 | ||
| TISSUE PATH Macrosette Cassettes | Fisher Healthcare | 15182706 | ||
| BD 10 ml Syringe | B-D | 309604 | ||
| Ethyl Alcohol | Pharmco-Aaper | E190 | Dilute to 70% with distilled water | |
| 20G Straight Feeding Needle | VWR | 20068-612 | ||
| 27G1/2 PrecisionGlide Needle | B-D | 305109 | ||
| Dissecting Scissors Sharp/Blunt Tip | VWR | 82027-588 | ||
| Waugh Forceps | VWR | 82027-428 | ||
| Non-absorbable Suture | LOOK Surgical Specialties | SP116 | ||
| Whatman Blotting Paper | VWR | 28298-020 | Cut as needed | |
| Nalgene Surfactant-Free Cellulose Acetate (SFCA) Filter | Cole-Parmer | EW-06731-2 | ||
| Carbon fiber composites digital caliper | Fisher Scientific | 15-007-958 |
Referências
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- Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic epithelium to dextran sodium sulfate-induced colitis. Gastroenterology. 131 (2), 579-588 (2006).
- Moolenbeek, C., Ruitenberg, E. J. The “Swiss roll”: a simple technique for histological studies of the rodent intestine. Lab Anim. 15 (1), 57-59 (1981).
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- Dieleman, L. A. Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (DSS) is characterized by Th1 and Th2 cytokines. Clin Exp Immunol. 114 (3), 385-391 (1998).
