Summary

Omurilik Elektrofizyoloji

Published: January 18, 2010
doi:

Summary

Elektrofizyolojik çalışmalar için yenidoğan fare omurilik izolasyonu bir gösteri.

Abstract

Yenidoğan fare omurilik sinir circuitries ve lokomotor hareketin gelişimi eğitimi için bir modeldir. Biz spinal kord diseksiyon ve lokomotor çalışmaları için kullanılan kayıt banyo yapay beyin omurilik sıvısı hazırlanması göstermektedir. Disseke, omurilik ventral sinir kökleri lomber kord içinde merkezi desen üreten devre elektrofizyolojik sinyaller kaydetmek için bir kayıt elektrot bağlı olabilir.

Protocol

1. Yapay beyin omurilik sıvısı (aCSF) 1 hazırlayın. Biz ilk magnezyum veya kalsiyum olmadan aCSF 10X stok 2L hazırlamak. Reaktifler millimolar listelenir. Katalog numaraları Sigma / Aldrich bakın. 2 Litre 10X aCSF (Mg veya Ca olmadan) Reaktif mM g/2L Katalog KCl 40 5,96 P-9333 NaCl <…

Discussion

Izole yenidoğan omurilik, sinir sistemi development1, 2 eğitim uysal bir yöntem sağlar. Neonatal kemirgenler lomber spinal kord içinde, merkezi desen üreten devre nörotransmitterlerin varlığı kurgusal lokomosyon üretebilir. Bu kurgusal lokomosyon 0,2 – 0,5 Hz üretilmektedir ritmik artar, aktivite patlamaları, oluşur. Bu patlamaları kablosu ve fleksör-ekstansör münavebe (L5 ipsilateral L2 akrabası) uzunluğu boyunca sol-sağ arda üretmek için organize edilir. Anormal davranış 3-5 farelerde bazı ge…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Samuel L. Pfaff Salk Biyolojik Araştırmalar Enstitüsü Gen İfadesi Laboratuvarlarında Profesör ve Howard Hughes Tıp Enstitüsü bir Araştırmacı. Bu çalışma, Christopher ve Dana Reeve Vakfı tarafından desteklenmiştir. Joe Belcovson, Kent Schnoeker Multimedya Kaynakları ve Salk Enstitüsü'nden Mike Sullivan, fotoğraf ve düzenleme ile ilgili yardım sağladı.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
KCl     P-9333  
NaCl     S-7653  
NaHCO3     S-6297  
NaH2PO4     S-9638  
Glucose     D-9434  
CaCl2     C-5080  
MgSO4     M-5921  
Large Scissors   Fine Science Tools 14070-12  
Forceps   Fine Science Tools 11050-10  
Fine Scissors   Fine Science Tools 15000-10  
Insect pins   Fine Science Tools 26002-10  
Sylgard 184 (Dow-Corning)        
1L volumetric flask        
100mL volumetric flask        

Referências

  1. Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
  2. Goulding, M., Pfaff, S. L. Development of circuits that generate simple rhythmic behaviors in vertebrates. Curr Opin Neurobiol. 15 (1), 14-20 (2005).
  3. Gallarda, B. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, (2008).
  4. Gosgnach, S. V1 spinal neurons regulate the speed of vertebrate locomotor outputs. Nature. 440 (7081), 215-219 (2006).
  5. Lanuza, G. M., Gosgnach, S., Pierani, A., Jessell, T. M., Goulding, M. Genetic identification of spinal interneurons that coordinate left-right locomotor activity necessary for walking movements. Neuron. 42 (3), 375-386 (2004).
  6. Jiang, Z., Carlin, K. P., Brownstone, R. M. An in vitro functionally mature mouse spinal cord preparation for the study of spinal motor networks. Brain Res. 816 (2), 493-499 (1999).
  7. Ziskind-Conhaim, L., Gao, B. X., Hinckley, C. Ethanol dual modulatory actions on spontaneous postsynaptic currents in spinal motoneurons. J Neurophysiol. 89 (2), 806-813 (2003).
  8. Tabak, J., Rinzel, J., O’Donovan, M. J. The role of activity-dependent network depression in the expression and self-regulation of spontaneous activity in the developing spinal cord. J Neurosci. 21 (22), 8966-8978 (2001).
  9. Chub, N., Mentis, G. Z., O’Donovan, M. J. Chloride-sensitive MEQ fluorescence in chick embryo motoneurons following manipulations of chloride and during spontaneous network activity. J Neurophysiol. 95 (1), 323-330 (2006).
check_url/pt/1660?article_type=t&slug=spinal-cord-electrophysiology

Play Video

Citar este artigo
Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal Cord Electrophysiology. J. Vis. Exp. (35), e1660, doi:10.3791/1660 (2010).

View Video