एकल सेल माउस शंकु photoreceptors से सक्शन रिकॉर्डिंग
Summary
हम दिखा देंगे कि कैसे एक माउस एक चूषण इलेक्ट्रोड का उपयोग शंकु से फ्लैश प्रतिक्रियाओं को रिकॉर्ड करने के लिए.
Abstract
रेटिना में रॉड और कोन photoreceptors प्रकाश का पता लगाने के लिए जिम्मेदार हैं. अंधेरे में, बाहरी खंड में चक्रीय nucleotide-gated चैनलों (सीएनजी) खुले हैं और फैटायनों प्रवाह करने के लिए तेजी से अंदर की ओर झिल्ली भर, depolarizing सेल की अनुमति. लाइट जोखिम सीएनजी चैनल, आवक कटियन वर्तमान प्रवाह ब्लॉक, और इस प्रकार सेल hyperpolarization में परिणाम बंद हो सके. Photoreceptors के polarity के आधार पर, एक चूषण रिकॉर्डिंग विधि है कि, क्लासिक पैच – दबाना तकनीक के विपरीत, प्लाज्मा झिल्ली मर्मज्ञ की आवश्यकता नहीं है 1970 के दशक में विकसित किया गया था<sup> 1</sup>. एक कसकर ढाले ग्लास विंदुक कोशिकी समाधान के साथ भरा में बाहरी खंड आरेखण परीक्षण फ़्लैश जोखिम पर अलग – अलग कक्षों में मौजूदा बदलाव की रिकॉर्डिंग की अनुमति देता है. बहरहाल, यह अच्छी तरह से स्थापित "बाहरी खंड में (ओएस में)" चूषण रिकॉर्डिंग माउस शंकु रिकॉर्डिंग के लिए उपयुक्त, माउस रेटिना में शंकु के कम प्रतिशत (3%) और कोन की पहचान करने में कठिनाइयों की वजह से नहीं है बाहरी क्षेत्रों. हाल ही में, एक आंतरिक खंड में विन्यास (में) रिकॉर्डिंग रिकॉर्डिंग विंदुक के भीतर खंड / फोटोरिसेप्टर के परमाणु क्षेत्र में आकर्षित करने के लिए विकसित किया गया था<sup2,3></sup>. इस वीडियो में, हम दिखा देंगे कि कैसे व्यक्तिगत माउस शंकु एकल कोशिका चूषण इलेक्ट्रोड का उपयोग photoresponses से रिकॉर्ड करने के लिए.
Protocol
Discussion
एकल कक्ष फोटोरिसेप्टर कोशिकाओं से चूषण रिकॉर्डिंग 3 दशक पहले विकसित किया गया था. यह हमें सक्षम बनाता पार झिल्ली वर्तमान कोशिका झिल्ली मर्मज्ञ बिना प्रकाश उत्तेजना से प्रेरित परिवर्तन रिकॉर्ड है. उच्?…
Acknowledgements
अनुसंधान से कैरियर विकास पुरस्कार के द्वारा समर्थित अनुसंधान से दृष्टिहीनता, NIH अनुदान 019312 EY, और अप्रतिबंधित अनुदान को रोकने के लिए दृष्टिहीनता और 02,687 EY (वाशिंगटन विश्वविद्यालय में नेत्र विज्ञान और दृश्य विज्ञान विभाग) रोकें.
Referências
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