Multieletrodo Recordings Matriz do Epitélio Vomeronasal

Summary

Multieletrodo array (MEA) gravações de fornecer um método para o estudo da atividade elétrica de grandes populações de neurônios. Aqui, apresentamos os detalhes de uma preparação MEA para gravar a partir do epitélio do mouse vomeronasal, ao mesmo tempo estimulando o tecido.

Abstract

Compreender os circuitos neurais requer métodos para gravar a partir de muitos neurônios simultaneamente. Para<em> In vitro</em> Estudos, uma tecnologia atualmente disponível é planar multieletrodo variedade de gravação (MEA). Aqui nós documentamos o uso de MEAs para estudar o rato órgão vomeronasal (VNO), que desempenha um papel essencial na detecção de feromônios e sinais sociais através de uma população diversificada de neurônios sensoriais expressando centenas de tipos de receptores. Combinando gravação MEA com um manipulador robótico líquido para entregar estímulos químicos, as respostas sensoriais de uma população grande e diversificada de neurônios pode ser gravado. A preparação nos permite remover o neuroepitélio intacta do VNO do mouse e estimular com uma bateria de produtos químicos ou ligantes potencial enquanto monitora a atividade elétrica dos neurônios durante várias horas. Portanto, essa técnica serve como um método útil para avaliar a atividade ligante, bem como explorar as propriedades dos neurônios receptores. Nós apresentamos as técnicas necessárias para preparar o epitélio vomeronasal, gravação de MEA, e estimulação química.

Protocol

Parte 1. Instrumentação gravação elétrica Nós usamos uma variedade multieletrodo planar (Instrumentos Científicos ALA) com 10 mM de eletrodos planos de titânio isolado com nitreto nitreto de silício. 60 eletrodos são dispostos em dois campos que consiste em uma grade 5×6 com o centro a centro-espaçamento de 30 mm. (Outras configurações também são possíveis; eletrodos com uma superfície de gravação de 10 m de diâmetro são melhores do que os eletrodos maior em termos de isolar a atividade d…

Discussion

Gravações série multieletrodo permitem-nos a capacidade de monitorar a atividade simultânea de uma grande população de neurônios. Esta é uma ferramenta útil para investigar as propriedades de um sistema sensorial, especificamente o VNO. Ao contrário do sistema olfatório, o VNO detecta estímulos em fase líquida. Além disso, o VNO é um tecido heterogêneo. Existem aproximadamente 300 tipos diferentes de receptores no mouse ^1, presumivelmente com perfis de resposta diferentes. Gravações MEA comb…