Investigando Tecido e órgãos específicos Responses Fitocromo usando FACS assistida Célula tipo Profiling expressão específica no Arabidopsis thaliana</em

Summary

A base molecular do espaço-respostas específicas fitocromo está sendo investigado o uso de plantas transgênicas que apresentam tecidos e órgãos específicos deficiências fitocromo. O isolamento de células específicas exibindo esgotamento cromóforo fitocromo induzida por fluorescência-Activated Celular classificação seguido por análises de microarray está sendo utilizada para identificar genes envolvidos em respostas espaciais específicos fitocromo.

Abstract

Media luz uma série de processos de desenvolvimento e de adaptação ao longo do ciclo de vida de uma planta. Plantas utilizam a luz de absorção de moléculas chamadas fotorreceptores de sentir e adaptar-se a luz. O vermelho / vermelho-extremo de absorção de luz fotorreceptores fitocromo têm sido estudadas extensivamente. Fitocromos existir como uma família de proteínas com funções distintas e sobrepostas em todos os sistemas de plantas superiores em que foram estudados

Protocol

1. Crescimento da Planta

1. Confirmado UAS-BVR X GAL4-GFP linha armadilha enhancer isoladas como descrito ⁴ (Para um resumo ver Fig. 1.) E as linhas do tipo selvagem ou parental são semeadas em solo, ou seja, ~ 2000 sementes esterilizadas por linha.
2. As plantas são cultivadas por 5 semanas em solo sob iluminação branca de 100 μmolm ^-2 s ^-1 a 22 ° C e umidade de 70%.

2. Folha de protoplastos de isolamento (adaptado de Denecke Vitale e ⁹⁾

1. Para isolar protoplastos, prepare TEX buffer. Para um buffer de litros TEX, pesar os seguintes componentes: 3,1 g sais Gamborg ....

Discussion

Perfil de expressão gênica através de microarrays (1) indicou que mais de 30% dos genes em Arabidopsis mudas são leves regulamentados e ¹¹ (2) identificou um vasto conjunto de genes que codificam proteínas de transdução de sinal de luz envolvidos na cascata de sinalização fitocromo ^{12, 13} . Tais experimentos sugerem que a luz induz a mudanças rápidas e de longo prazo na expressão genética. Cada pool de fitocromos pode controlar apenas um subconjunto de respostas de desenvolvimento e de adaptação. A.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anticorpo anti-BVR	QED Bioscience Inc.	56257-100
Celulase “ Onozuka” R-10	SERVA Eletroforese	MSPC 0930
Gamborg' s Mistura de sais basais B5	Sigma-Aldrich	G5768
Macerozyme R-10	SERVA Eletroforese	PTC 001
MES, baixo teor de umidade	Sigma-Aldrich	M3671
Sais de Murashige e Skoog	Caisson Laboratories	74904
Phytablend	Caisson Laboratories	28302
RNeasy Plant Minikit	Qiagen	16419