متجانسة الكشف السريع عن طريق فحوصات البيولوجي المغناطيسي نظام Biosensing التحوير
Summary
ويستخدم نظام مغناطيسي لتعديل biosensing بسرعة ، بحساسية وبساطة كشف المقايسات البيولوجية ، مثل جزيئات الحمض النووي والبروتينات.
Abstract
نظام مغناطيسي biosensing التعديل (MMB) [1،2] بسرعة والكشف عن الأهداف الحيوية بشكل متجانس في تركيزات منخفضة دون أي خطوة الغسيل أو الانفصال. عندما IL – 8 الهدف كان حاضرا ، وهو 'sandwich' المستندة إلى مقايسة المرفقة مع الخرز المغناطيسي IL – 8 القبض على الضد streptavidin بروتين فلوري جانب طريق مستهدفة IL – 8 و IL – 8 biotinylated الأضداد. وناور حبات المغناطيسي في حركة متذبذبة من خلال تطبيق المجال المغناطيسي بالتناوب التدرج من خلال قطبين الكهرومغناطيسي. ومكثف البروتينات الفلورية ، والتي تعلق على حبات المغناطيسي في المنطقة والكشف عن تحركاتهم داخل وخارج لشعاع الليزر متعامد تنتج إشارة الدوري الفلورسنت التي يتم الكشف demodulated باستخدام متزامن. كان يستخدم سابقا biosensing تعديل النظام المغناطيسي للكشف عن تسلسل الترميز للبروتين الفيروس غير الهيكلية ايباراكي 3 (NS3) DNA التكميلية ([كدنا]) [2]. ويمكن استخدام التقنيات التي أثبتت في هذا العمل الخارجي للتلاعب والتكثيف من الجزيئات لتطبيقات أخرى ، مثل تسليم المخدرات ، إلى جانب مغناطيسيا<em> في الجسم الحي.</em> أو على النقيض من أجل تعزيز<em> في الجسم الحي.</emتطبيقات التصوير>.
Protocol
Discussion
باختصار ، لقد أظهرنا أنه يمكن استخدام هذا النظام MMB للكشف عن وجود IL – 8 هدف في تركيزات منخفضة (0.5 بيكو غرام هو الحد من الكشف عن فحوصات دقيقة بيو برو خلوى الصفيف [3،4]). لا يقتصر على قدرة النظام على IL – 8 ، ويمكن استخدامها للكشف عن البروتينات الأخرى. مزايا نظام MMB هي القدرة على ?…
Acknowledgements
وأيد هذا العمل جزئيا من صندوق هورويتز إيشايا.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set | Bio-Rad | 171-B5008M | ||
| Recombinant human IL-8 target | Thermo Scientific | R202625 | ||
| Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8 | BD Biosciences | 554718 | ||
| Streptavidin coupled fluorescent protein | Bio-Rad | Streptavidin PE |
Referências
- Danielli, A., Arie, A., Porat, N., Ehrlich, M. Detection of fluorescent-labeled probes at sub-picomolar concentrations by magnetic modulation. Optics Express. 16, 19253-19259 (2008).
- Danielli, A., Porat, N., Arie, A., Ehrlich, M. Rapid homogenous detection of the Ibaraki virus NS3 cDNA at pico-molar concentrations by magnetic modulation. Biosensors and Bioelectronics. 25, 858-863 (2009).
- . . Bio-Rad “Human angiogenesis assay panel”. , .
- . Instruction Manual. Bio-Plex Precision Pro Cytokine Assay. , .
