L'instillation trachéale directe des solutés dans les poumons de souris
Summary
Instillations intratrachéale offrir solutés directement dans les poumons. Cette procédure vise la livraison de l'instillation dans les régions distales du poumon, et est donc souvent incorporées dans des études visant à étudier les alvéoles. Nous fournissons un protocole de survie détaillées pour effectuer des instillations intra-trachéale chez les souris.
Abstract
Instillations intratrachéale offrir solutés directement dans les poumons. Cette procédure vise la livraison de l'instillation dans les régions distales du poumon, et est donc souvent incorporées dans des études visant à étudier les alvéoles. Nous fournissons un protocole de survie détaillées pour effectuer des instillations intra-trachéale chez les souris. En utilisant cette approche, on peut cibler la livraison des solutés de test ou des solides (comme les traitements du poumon, tensioactifs, les virus et les oligonucléotides de petite taille) dans le poumon distal. Instillations trachéales peut être la méthode privilégiée, sur les protocoles d'inhalation qui peut ciblent principalement les voies respiratoires supérieures et peut exposer le chercheur à des substances potentiellement dangereuses. En outre, en utilisant le protocole d'instillation trachéale, les animaux peuvent se remettre complètement de la procédure non-invasive. Cela permet de faire suite des mesures physiologiques sur les animaux d'essai, ou à la réinstallation en utilisant le même animal. Le montant de l'instillation introduit dans les poumons doit être soigneusement déterminé et osmotiquement équilibrée pour assurer la récupération des animaux. Typiquement, le volume de 30 à 75 uL instillation peuvent être introduits dans des poumons de souris.
Protocol
Discussion
Instillations intra-trachéale ont été utilisées dans plusieurs études différentes pour évaluer la toxicité des composés d'essai (6), induisent des lésions pulmonaires alvéolaires (4, 7), remplacer les tensioactifs (8), ainsi que de modifier l'expression des gènes via la livraison de petits oligonucleotides directement dans le poumon (5). Nous explorons actuellement l'utilisation d'instiller 1) fluorescentes redox matériau sensible dans les poumons afin de mesurer le stress oxydatif in vivo d…
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par le NIH K99 HL09222601 et le S & R Fondation Ryaji Uneo Award décerné à MNH.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary Sterling , MA | 14043-220-05 | ||
| Xylazine | Lloyd Laboratories Shenandoah, IA | New Animal Drug Application #139-236 | ||
| Ketamine | Bioniche Pharma Lake Forest, IL | 67457-001-10 | ||
| Nair | Available at drug stores | |||
| 1mL SubQ Syringe | BD Syringe Franklin Lakes, NJ | 309597 | 26 5/8 G | |
| 4-0 Nylon Suture | Ethicon San Lorenzo, Puerto Rico | 1894G.S30 |
Referências
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