החדרה ישירה של קנה הנשימה אל הריאות מומסים עכבר
Summary
Instillations Intratracheal לספק מומסים ישירות לריאות. הליך זה מטרות אספקת instillate לתוך אזורים דיסטלי של הריאה, ולכן שולבו לעתים קרובות במחקרים שמטרתם ללמוד alveoli. אנו מספקים הישרדות פרוטוקול מפורט לביצוע instillations intratracheal בעכברים.
Abstract
Instillations Intratracheal לספק מומסים ישירות לריאות. הליך זה מטרות אספקת instillate לתוך אזורים דיסטלי של הריאה, ולכן שולבו לעתים קרובות במחקרים שמטרתם ללמוד alveoli. אנו מספקים הישרדות פרוטוקול מפורט לביצוע instillations intratracheal בעכברים. שימוש בגישה זו, ניתן למקד את המסירה של מומסים מבחן או מוצקים (כגון ריאות ותרופות, פעילי שטח, וירוסים oligonucleotides קטנים) לתוך הריאות דיסטלי. Instillations קנה הנשימה עשוי להיות מתודולוגיה מועדפת, על פרוטוקולים משאיפת שעשויים בעיקר היעד בדרכי הנשימה העליונות ואולי לחשוף את החוקר לחומרים העלולים להיות מסוכנים. בנוסף, באמצעות פרוטוקול החדרה קנה הנשימה, בעלי חיים יכולים להתאושש באופן מלא בהליך פולשני. זה מאפשר ביצוע מדידות פיזיולוגיות לאחר מכן על חיות הבדיקה, או התקנה מחדש באמצעות בעלי חיים זהה. כמות instillate שהוכנסו הריאה צריכה להיקבע בזהירות מאוזנת אוסמוטי על מנת להבטיח התאוששות של בעלי חיים. בדרך כלל, 30-75 נפח instillate μL יכול להיות מוחדר ריאות העכבר.
Protocol
Discussion
Instillations Intratracheal שימשו מספר מחקרים שונים כדי להעריך את הרעילות של תרכובות מבחן (6), לגרום נזק ריאות מכתשיים (4, 7), להחליף חומרים פעילי שטח (8), כמו גם לשנות ביטוי גנים באמצעות מסירת oligonucleotides קטן ישירות לתוך ריאה (5). כרגע אנחנו בוחנים את השימוש של הקניית 1) חומר זרחני חיזור רגי…
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי NIH K99 HL09222601 וה-S & R קרן Ryaji פרס Uneo הוענק MNH.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary Sterling , MA | 14043-220-05 | ||
| Xylazine | Lloyd Laboratories Shenandoah, IA | New Animal Drug Application #139-236 | ||
| Ketamine | Bioniche Pharma Lake Forest, IL | 67457-001-10 | ||
| Nair | Available at drug stores | |||
| 1mL SubQ Syringe | BD Syringe Franklin Lakes, NJ | 309597 | 26 5/8 G | |
| 4-0 Nylon Suture | Ethicon San Lorenzo, Puerto Rico | 1894G.S30 |
Referências
- Driscoll, K. E., Costa, D. L., Hatch, G., Henderson, R., Oberdorster, G., Salem, H., Schlesinger, R. B. Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: uses and limitations. Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).
- Helms, M. N., Jain, L., Self, J. L., Eaton, D. C. Redox regulation of epithelial sodium channels examined in alveolar type 1 and 2 cells patch-clamped in lung slice tissue. J Biol Chem. 283, 22875-22883 (2008).
- Helms, M. N., Self, J., Bao, H. F., Job, L. C., Jain, L., Eaton, D. C. Dopamine activates amiloride-sensitive sodium channels in alveolar type I cells in lung slice preparations. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 291, L610-L618 (2006).
- Iyer, S. S., Ramirez, A. M., Ritzenthaler, J. D., Torres-Gonzalez, E., Roser-Page, S., Mora, A. L., Brigham, K. L., Jones, D. P., Roman, J., Rojas, M. Oxidation of extracellular cysteine/cystine redox state in bleomycin-induced lung fibrosis. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296, L37-L45 (2009).
- Li, T., Folkesson, H. G. RNA interference for alpha-ENaC inhibits rat lung fluid absorption in vivo. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 290, L649-L660 (2006).
- Sager, T., Porter, D., Robinson, V., Lindsley, W., Schwegler-Berry, D., Castranova, V. An improved method to disperse nanoparticles for in vitro and in vivo investigation of toxicity. Nanotoxicol. 1, 118-129 (2007).
- Xu, J., Gonzalez, E. T., Iyer, S. S., Mac, V., Mora, A. L., Sutliff, R. L., Reed, A., Brigham, K. L., Kelly, P., Rojas, M. Use of senescence-accelerated mouse model in bleomycin-induced lung injury suggests that bone marrow-derived cells can alter the outcome of lung injury in aged mice. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 64, 731-739 (2009).
- Yeh, T. F., Lin, H. C., Chang, C. H., Wu, T. S., Su, B. H., Li, T. C., Pyati, S., Tsai, C. H. Early intratracheal instillation of budesonide using surfactant as a vehicle to prevent chronic lung disease in preterm infants: a pilot study. Pediatrics. 121, e1310-e1318 (2008).
