Summary

Хронический Сальмонеллы Зараженные Модель мыши

Published: May 31, 2010
doi:

Summary

Создание хронического бактериального инфицированных мышах со стойкими<em> Сальмонеллы</em> Typhimurium колонизации в кишечнике в течение 27 недель.

Abstract

Бактериальных инфицированных мышах представляет собой мощную систему моделью для изучения таких областях, как инфекции, воспаления, иммунологии, передача сигнала, и опухолей. Многие исследователи воспользовались колит индуцированных<em> Сальмонеллы</em> Typhimurium для исследования ранней фазы воспаления и инфекции. Тем не менее, лишь немногие отчеты о хронической инфекции<em> В естественных условиях</em>. Мыши с<em> Сальмонеллы</em> Стойкий существование в желудочно-кишечном тракте позволит нам изучить долгосрочные хост-бактериальных взаимодействие, передача сигнала, и опухолей. Мы установили хронический бактериальный инфицированных мышах с<em> Сальмонеллы</em> Typhimurium колонизации в кишечнике мышей в течение 6 месяцев. Для использования этой системы, это необходимо для исследователя, чтобы узнать, как подготовить бактериальные культуры и принудительным кормлением животных. Мы подробно методология подготовки бактериальные культуры и принудительным кормлением мышей. Мы также покажем, как определить,<em> Сальмонеллы</em> Настойчивость в желудочно-кишечном тракте. В целом, этот протокол поможет исследователям использованием бактериальных инфицированных модель мыши для решения принципиально важных биологических и микробиологических вопросы.

Protocol

Этот протокол включает в себя три части: бактериальные культуры, мышь желудочный зонд, и сальмонеллы обнаружения. 1. Сальмонеллы условием роста. Подготовка Salmonella Лурия-Бертани бульон (LB) пластины, инкубировать при температуре 37 ° С в течение ночи. <li…

Discussion

Для использования этой системы, это необходимо для исследователя чтобы узнать, как зонд животных. Мы подробно методология подготовки бактериальные культуры и принудительным кормлением мышей. Мы также показываем, как осуществлять мониторинг сальмонеллы настойчивость в желудочн?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Эта работа была поддержана NIDDK KO1 DK075386 гранта и Американского онкологического общества RSG-09-075-01-MBC в июне ВС

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
HBSS   Sigma ABCD1234  
Luria-Bertani broth   BD 244610  
Feeding needle   Popper & Sons, Inc 7920  
Streptomycin   MP biomedicals, LLC 100556  
BBL CHROMagar Salmonella   BD 214983  
Disposable cell spreaders   Biologix research company 65-1010  

Referências

  1. Duan, Y. beta-Catenin activity negatively regulates bacteria-induced inflammation. Lab Invest. 87 (6), 613-624 (2007).
  2. Barthel, M. Pretreatment of mice with streptomycin provides a Salmonella enterica serovar Typhimurium colitis model that allows analysis of both pathogen and host. Infection and immunity. 71 (5), 2839-2858 (2003).
  3. Miller, S. I., Mekalanos, J. J. Constitutive expression of the phoP regulon attenuates Salmonella virulence and survival within macrophages. Journal of bacteriology. 172 (5), 2485-2490 (1990).
  4. Valdez, Y. Nramp1 expression by dendritic cells modulates inflammatory responses during Salmonella Typhimurium infection. Cell Microbiol. 10 (8), 1646-1661 (2008).
  5. Woo, H., Okamoto, S., Guiney, D., Gunn, J. S., Fierer, J. A model of Salmonella colitis with features of diarrhea in SLC11A1 wild-type mice. PLoS ONE. 3 (2), e1603-e1603 (2008).
  6. Dangl, J. L. Molecular call-and-response: how Salmonella learns the gospel from its host. Trends Microbiol. 11 (6), 245-246 (2003).
  7. Zaharik, M. L., Vallance, B. A., Puente, J. L., Gros, P., Finlay, B. B. Host-pathogen interactions: Host resistance factor Nramp1 up-regulates the expression of Salmonella pathogenicity island-2 virulence genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99, 15705-15710 (2002).
  8. Townsend, P., Morton, D. B. Laboratory Animal Care Policies and Regulations: United Kingdom. ILAR J. 37 (2), 68-74 (1995).
  9. Olfert, E. D., Godson, D. L. Humane endpoints for infectious disease animal models. ILAR J. 41 (2), 99-104 (2000).
  10. Ye, Z., Petrof, E. O., Boone, D., Claud, E. C., Sun, J. Salmonella effector AvrA regulation of colonic epithelial cell inflammation by deubiquitination. Am J Pathol. 171 (3), 882-892 (2007).
  11. Grassl, G. A., Valdez, Y., Bergstrom, K. S., Vallance, B. A., Finlay, B. B. Chronic enteric salmonella infection in mice leads to severe and persiste nt intestinal fibrosis. Gastroenterology. 134 (3), 768-780 (2008).
  12. Sukupolvi, S., Edelstein, A., Rhen, M., Normark, S. J., Pfeifer, J. D. Development of a murine model of chronic Salmonella infection. Infection and immunity. 65 (2), 838-842 (1997).
  13. . . Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL). , (2007).
  14. Wu, S., Lu, R., Zhang, Y., Sun, J. Chronic effects of a Salmonella type III secretion effector protein AvrA in vivo. PLoS ONE. , (2010).
check_url/pt/1947?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Wu, S., Lu, R., Zhang, Y., Sun, J. Chronic Salmonella Infected Mouse Model. J. Vis. Exp. (39), e1947, doi:10.3791/1947 (2010).

View Video