Estabelecer um modelo de camundongo bacteriana crônica infectados com persistente<em> Salmonella</em> Typhimurium colonização no intestino durante 27 semanas.
Abstract
O modelo do rato infectado de bactérias é um sistema poderoso modelo para o estudo de áreas tais como inflamação, infecção, imunologia, transdução de sinal, e tumorigênese. Muitos pesquisadores têm se aproveitado da colite induzida por<em> Salmonella</em> Typhimurium para os estudos sobre a fase inicial de inflamação e infecção. No entanto, poucos relatos são a infecção crônica<em> In vivo</em>. Camundongos com<em> Salmonella</em> Existência persistente no trato gastrointestinal nos permitem explorar a host-bacteriana interação a longo prazo, transdução de sinal, e tumorigênese. Nós estabelecemos um modelo de camundongo bacteriana crônica infectados com<em> Salmonella</em> Typhimurium colonização no intestino do rato mais de 6 meses. Para utilizar este sistema, é necessário que o pesquisador para aprender a preparar a cultura bacteriana e sonda os animais. Detalhamos uma metodologia para cultura bacteriana preparar e ratos gavagem. Também mostramos como detectar a<em> Salmonella</em> Persistência no trato gastrointestinal. Globalmente, este protocolo vai ajudar os pesquisadores usando o modelo de camundongo infectado de bactérias para tratar fundamentalmente importantes questões biológicas e microbiológicas.
Protocol
Este protocolo inclui três partes: detecção de cultura bacteriana, gavage mouse, e Salmonella. 1. Condições de crescimento Salmonella. Prepare a Salmonella Luria-Bertani caldo de placa (LB), incubar a 37 ° C durante a noite. Escolha um clone da placa de LB e colocar em 7 LB ml em um tubo de 12 ml, e agitar a 37 ° C por cerca de 5 horas. Inocular 50 ml LB com 0,05 ml de uma cultura de fase estacionária e incubar a 37 ° C sem a…
Discussion
Para utilizar este sistema, é necessário que o pesquisador para aprender a gavagem os animais. Detalhamos uma metodologia para preparar a cultura bacteriana e gavagem a camundongos. Também mostramos como monitorar a persistência de Salmonella no trato gastrointestinal (TGI). Os passos críticos neste protocolo, incluindo:
Estreptomicina pré-tratamento: Estreptomicina pré-tratamento, poderia se livrar de alguns comensais da flora intestinal e fazer os ratos suscetíveis à infecção por S…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pelo NIDDK KO1 DK075386 subvenção ea Sociedade Americana do Câncer RSG-09-075-01-MBC para junho dom