Upprätta en kronisk bakteriell infekterad musmodell med ihållande<em> Salmonella</em> Typhimurium kolonisering i tarmen ytterligare 27 veckor.
Abstract
Den bakterie infekterade musmodell är ett kraftfullt modellsystem för att studera områden som infektion, inflammation, immunologi, signaltransduktion, och Tumörgenesens. Många forskare har dragit nytta av kolit inducerad av<em> Salmonella</em> Typhimurium för studier av den tidiga fasen av inflammation och infektion. Men bara ett fåtal rapporter på kronisk infektion<em> In vivo</em>. Möss med<em> Salmonella</em> Ihållande existens i mag-tarmkanalen ger oss möjlighet att utforska den långsiktiga host-bakteriell interaktion, signaltransduktion, och Tumörgenesens. Vi har etablerat en kronisk bakteriell infekterad musmodell med<em> Salmonella</em> Typhimurium kolonisationen i musen tarmen över 6 månader. För att använda detta system är det nödvändigt för forskaren att lära sig att förbereda bakterieodling och sondmatning djuren. Vi detalj en metod för att förbereda bakteriekultur och sondmatning möss. Vi visar också hur man kan upptäcka<em> Salmonella</em> Persistens i mag-tarmkanalen. Sammantaget kommer detta protokoll bistånd forskare som använder den bakteriella smittade musmodell för att ta itu principiellt viktiga biologiska och mikrobiologiska frågor.
Protocol
Detta protokoll innehåller tre delar: bakteriekultur, mus sondmatning, och Salmonella upptäckt. 1. Salmonella tillväxt skick. Förbered Salmonella Luria-Bertani buljong (LB) agar, inkubera vid 37 ° C över natten. Välj en klon från LB plattan och tas i 7 ml LB i en 12 ml tub, och skaka vid 37 ° C i ca 5 timmar. Inokulera 50 ml LB med 0,05 ml av en stationär fas kultur och inkubera vid 37 ° C utan att skaka i ca 18 timmar. </l…
Discussion
För att använda detta system är det nödvändigt för forskaren att lära sig att sondmatning djuren. Vi detalj en metod för att förbereda bakteriekultur och sondmatning till möss. Vi visar också hur man kan övervaka Salmonella persistens i gastrointestinal (GI) tarmkanalen. Den kritiska steg i detta protokoll, inklusive:
Streptomycin-förbehandling: streptomycin-förbehandling kan bli av med några kommensala tarmflora och göra möss mottagliga för salmonella infektion 2.</…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete stöddes av NIDDK KO1 DK075386 bidrag och American Cancer Society RSG-09-075-01-MBC till juni Sön