بروتوكول يلي الخطوط العريضة لعملية تشريح البنكرياس للتصوير شريحة الظاهري ، والقياس الكمي لاحقة من جميع GFP الموسومة خلايا بيتا في البنكرياس بأكمله.
Abstract
تتبع التغيرات في خلية معينة من السكان في الصحة والمرض هو هدف مهم للبحوث الطبية الحيوية. عملية رصد انتشار خلايا بيتا في البنكرياس ، ونمو الجزيرة هو تحديا من نوع خاص. طورنا طريقة لالتقاط توزيع خلايا بيتا في البنكرياس سليمة من الفئران المعدلة وراثيا مع مضان الموسومة خلايا بيتا مع ماكرو مكتوبة لImageJ (rsb.info.nih.gov / ط /). بعد تشريح البنكرياس وتطهير الأنسجة ، ويتم التقاط البنكرياس بأسره شريحة افتراضية ، وبعد ذلك يتم فحص GFP الموسومة خلايا بيتا. ويشمل التحليل الكمي لمجموع عدد خلايا بيتا منطقة الجزيرة ، وتوزيع حجم مع الإشارة إلى معلمات وأماكن محددة لكل جزيرة ومجموعات صغيرة من خلايا بيتا. يمكن رسم توزيع كامل من الجزر في ثلاثة أبعاد ، والمعلومات عن توزيع على حجم وشكل كل جزيرة يسمح مقارنة كمية ونوعية التغيرات في مجال خلايا بيتا الشاملة في لمحة.
Protocol
الجزء 1 : إعداد العينات مكان ماوس تحت المجهر تشريح ، وإزالة كامل البنكرياس مع الاثني عشر والطحال لا تزال تعلق ، ومكان الأجهزة على شريحة زجاجية قبل زنه. إزالة الاثنى عشر عن طريق قطع النسيج الضام لها على طول الجانب ، حيث ك…
Discussion
تحليل الصور الظاهري شريحة من الجزر ومجموعات خلايا بيتا في البنكرياس سليمة يقدم وجهة نظر واسعة النطاق لتوزيع كامل من الجزر. وبالتالي يمكن أن التطورات والتغيرات في توزيع مجموع جزيرة بمرور الوقت يمكن دراستها ومقارنتها. ويتجلى هذا مثلا في تحليلنا لتشكيل جزيرة البنكريا?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وتدعم هذه الدراسة من قبل الولايات المتحدة الصحة العامة خدمة المنح DK – 081527 ، 072473 وDK DK – 20595 لجامعة شيكاغو ومركز أبحاث السكري التدريب (الحيوان النماذج الأساسية) ، وهبة من مؤسسة أسرة Kovler.