פרוטוקול הבא מתאר את התהליך של דיסקציה הלבלב הדמיה פרוסה וירטואלית, ועל כימות הבאים של כל ה-GFP-tagged בתאי בטא בלבלב כולו.
Abstract
האיתור שינויים של אוכלוסיות תאים ספציפיים בבריאות ובחולי היא מטרה חשובה של מחקר ביו. תהליך שגשוג התא בטא בלבלב ניטור צמיחה איון הוא מאתגר במיוחד. פיתחנו שיטה כדי ללכוד את חלוקת בטא בלבלב תאים שלמים של העכברים הטרנסגניים עם הקרינה-tagged בטא תאים עם מאקרו נכתב עבור ImageJ (rsb.info.nih.gov / ij /). בעקבות לנתיחה הלבלב וניקוי רקמות הלבלב, כולו נתפס כמו פרוסת וירטואלי, שלאחריו GFP-tagged בטא התאים נבדקות. הניתוח כולל את כימות המספר הכולל תא בטא, איון אזור והפצה גודל תוך התייחסות לפרמטרים מיקומים ספציפיים עבור כל איון עבור אשכולות קטנים של תאים בטא. הפצה כולו של איונים ניתן להתוות בשלושה ממדים, וגם את המידע על התפלגות גודל וצורה של איון כל מאפשר השוואה כמותית ואיכותית של שינויים באזור בטא תא הכוללת במבט אחד.
Protocol
חלק 1: הכנת דוגמאות המקום עכבר תחת מיקרוסקופ לנתיחה, להסיר את הלבלב כולו יחד עם התריסריון והטחול עדיין מחוברת, והמקום איברים בשקופית זכוכית טרום שקל. הסר את התריסריון על ידי חיתוך הרקמה החיבורית שלה בצד שבו הוא חייב הל?…
Discussion
ניתוח של תמונות Slice וירטואלי של איים וביתא תאים בלבלב אשכולות שלמים מספק תצוגה רחב היקף של חלוקת כל האיונים. התפתחויות ושינויים בחלוקת איון מוחלט לאורך זמן ולכן יכול להיות למד בהשוואה. כזה למשל הוא הפגינו הניתוח שלנו של היווצרות הלבלב איון (1). ניתוח מקיף של pancreata עכברי…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחקר נתמך על ידי ארצות הברית השירות לבריאות הציבור של גרנט DK-081527, 072473 ו DK-DK-20595 של אוניברסיטת שיקגו סוכרת מחקר מרכז הדרכה (Core מודלים בבעלי חיים), ואת מתנת קרן משפחת קובלר.