Lesão neural induzida por laser de dois fótons: um método para observar a degeneração e regeneração do axônio em larvas de Drosophila

Neste artigo

Resumo

Fonte: Li, D., et al. Um modelo de lesão in vivo de Drosophila para estudar a neuroregeneração no sistema nervoso periférico e central. J. Vis. Exp. (2018).

Este vídeo descreve a ablação a laser de dois fótons de axônios em uma larva de Drosophila melanogaster e um exemplo de protocolo para induzir lesão e imagem do local da lesão.

Protocolo

Este protocolo é um trecho de Li et al., Um modelo de lesão in vivo de Drosophila para estudar a neuroregeneração no sistema nervoso periférico e central, J. Vis. Exp. (2018).

1. Lesão de dois fótons e imagens confocais

Configuração do microscópio
OBSERVAÇÃO: Um microscópio confocal de varredura a laser com um laser de dois fótons foi usado para este experimento, mas outros sistemas com uma configuração equivalente também serão suficientes. O laser de dois fótons (930 nm) foi usado para aplicar lesões e um laser de argônio (488 nm) foi usado para imagens confocai....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

figure-results-1
Figura 1: A regeneração do axônio do neurônio Da na periferia exibe especificidade de classe. (A e B) Desenho esquemático mostrando a posição das larvas. (C) Desenho esquemático dos neurônios da classe III. (D) Axônios dos neurônios da classe III ddaF, marcados com 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80 / +, não voltam a crescer. (E) Desenho esquemático d.......