Zwei-Photonen-Laser-induzierte neuronale Verletzung: Eine Methode zur Beobachtung der Axondegeneration und Regeneration bei Drosophila Larven

Abstract

Quelle: Li, D., et al. A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System. J. Vis. (2018).

Dieses Video beschreibt die zweiphotonen Laserablation von Axonen in einer Drosophila melanogaster Larve und ein Beispielprotokoll, um Verletzungen zu induzieren und die Verletzungsstelle abzubilden.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Li et al.,A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018). 1. Zwei-Photonen-Verletzung und konfokale Bildgebung Mikroskop-SetupHINWEIS: Für dieses Experiment wurde ein konfokales Laserscanmikroskop mit einem Zwei-Photonen-Laser verwendet, aber auch andere Systeme mit entsprechender Einrichtung reichen aus….

Representative Results

Abbildung 1: Die Regeneration des Da-Neuron-Axons in der Peripherie zeigt die Klassenspezifität an. (A und B) Schematische Zeichnung, die die Position der Larven zeigt. (C) Schematische Zeichnung der Klasse III da Neuronen. (D) Axone der Klasse III da neurons ddaF, beschriftet mit 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, nicht nachwachsen. (E) Schematisc…

Materials

Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous	Acros Organics	AC615080010
Halocarbon 27 Oil	Genesee Scientific	59-133
Propionic Acid	J.T.Baker	U33007
Cover Glasses: Rectangles	Fisher Scientific	12-544-D	50 mm X 22 mm
Zeiss LSM 880 laser scanning microscope	Zeiss
Zen software	Zeiss
Chameleon Ultra II	Coherent