הזרקת זבובים דרוזופילה למבוגרים: שיטה של משלוח תרכובת או תווית

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: Nazario-טול, A. E., וו, L. P. הערכת התגובה החיסונית התאית של זבוב הפירות, Drosophila מלנוגאסטר, באמצעות In Vivo Phagocytosis Assay. ג’יי ויס אקספ. (2019).

וידאו זה מתאר כיצד לבצע זריקה של זבובים בוגרים חיים וכולל פרוטוקול לדוגמה שבו חלקיקים שכותרתו כחול trypan מוזרקים בבטן לעוף כדי לעבור phagocytosis.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Nazario-Toole ו- וו, הערכת התגובה החיסונית התאית של זבוב הפירות, Drosophila melanogaster, באמצעות In Vivo Phagocytosis Assay, J. Vis. Exp. (2019). 1. הכן חלקיקי פלואורסצנטין להזרקה לשקם 10 מ”ג של זמין מסחרית, חום נהרג חלקיקי חיידקים שכותרתו פלואורסצנטין (ראה טבלה של ח…

Materials

5430-10 PicoNozzle Kit World Precision Instruments 5430-10 Holder for 1.0mm pipette
E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate Invitrogen E2861 Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm)
Needle Pipette Puller David Kopf Instruments Model 725
Pneumatic PicoPump PV820 World Precision Instruments SYS-PV820 The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections.
The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid – allowing delivery of sub-nanoliter volumes.
The amount of liquid delivered depends on two main variables – the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied.
set the instrument to 100 ms "TIMED" mode.
Thin Wall Glass Capillaries World Precision Instruments TW100F-3 Needles for injection. OD = 1.0 mm
Trypan Blue Solution (0.4%) Sigma T8154 Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles.
check_url/pt/20113?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Injection of Adult Drosophila Flies: A Method of Compound or Label Delivery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20113, doi: (2023).

View Video