דרוזופילה בויו הדמיית סידן: שיטה להדמיה תפקודית של פעילות עצבית

Abstract

מקור: הנקוק, C. E., ואח ‘. ב Vivo אופטי סידן הדמיה של למידה-induced פלסטיות סינפטית במלנוגאסטר דרוזופילה. ג’יי ויס אקספ. (2019).

וידאו זה מתאר הדמיית סידן vivo בנוירונים Drosophila באמצעות GCaMP. סרטון הפרוטוקול המוצג מראה כיצד לתעד שינויים בפלואורסצנטיות GCaMP של נוירונים בגוף פטריות במהלך ניסוי מיזוג חוש הריח.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך הנקוק ואח ‘, ב Vivo אופטי סידן הדמיה של פלסטיקה סינפטית הנגרמת על ידי למידה ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019). 1. בהדמיית סידן vivo השתמש במיקרוסקופ מולטי פוטון המצויד בלייזר אינפרא אדום ומטרת טבילה במים (ראה טבלת חומרים), המותקנת על ?…

Materials

1-Octen-3-ol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	O5284	Chemical used as odorant
3-Octanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	218405	Chemical used as odorant
4-Methylcyclohexanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	153095	Chemical used as odorant
Bandpass filter for EGFP (525/50 nm)	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany
Mineral oil	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	M8410	Used as diluent for odorants
Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2	Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA		Tunable infrared femtosecond laser
Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany		Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices.
Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany	421452-9900-000	Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm
Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope	Custom-written and available upon request	n.a.	n.a.