Дрозофила Виво Кальциевая визуализация: метод функциональной визуализации нейронной активности

Abstract

Источник: Хэнкок, C. E., и др. In Vivo оптический кальций Изображения обучения индуцированной синаптической пластичности в Drosophila меланогастер. J. Vis. Exp. (2019).

Это видео описывает в виво кальция изображений в дрогофила нейронов с помощью GCaMP. Рекомендуемые протокол клип показывает, как записывать изменения в GCaMP флуоресценции от нейронов грибного тела во время обонятельного кондиционирования эксперимента.

Protocol

Этот протокол является выдержкой из Хэнкок и др., In Vivo оптических кальция изображений обучения индуцированной синаптической пластичности в Drosophila меланогастер, J. Vis. Exp. (2019). 1. Виво кальция изображений Используйте мультифотонный микроскоп, оснащенный ?…

Materials

1-Octen-3-ol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	O5284	Chemical used as odorant
3-Octanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	218405	Chemical used as odorant
4-Methylcyclohexanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	153095	Chemical used as odorant
Bandpass filter for EGFP (525/50 nm)	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany
Mineral oil	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	M8410	Used as diluent for odorants
Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2	Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA		Tunable infrared femtosecond laser
Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany		Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices.
Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany	421452-9900-000	Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm
Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope	Custom-written and available upon request	n.a.	n.a.