C. elegans Extrusión de Gonad: una técnica de disección rápida
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Gervaise, A. L. y Arur, S. Análisis espacial y temporal de ERK activo en la línea C. elegans . J. Vis. (2016).
Este video describe un método para diseccionar gónadas de hermafroditas C. elegans adultas, lo que resulta en tejidos que son adecuados para la inmunodetección y las imágenes fluorescentes.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Gervaise y Arur, Análisis espacial y temporal de ERK activo en la línea C. elegans Germline. J. Vis. (2016). 1. Disección de gusanos adultos para obtener gónada Elija 100 – 150 WT (N2) o genotipo deseado de gusanos en la etapa de desarrollo deseada y específica (L1, L2, L3, L4, adulto, etc.)…
Materials
| Flat bottom glass watch dish | Agar Scientific | AGL4161 | We use glass because dissected gonads often stick to plastic |
| 25 G needles | BD PrecisionGlide | 305122 | |
| Syringes (could be 1 or 5 mL) | BD Syringes | 1 mL: BD 309659 | |
| Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm) | Fisherbrand | 12-550-343 | |
| Clinical bench top centrifuge | |||
| *M9 solution | |||
| Levamisole | Sigma | L9756 | |
| *M9 Buffer Recipe | 3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L. |
Citar este artigo
C. elegans Gonad Extrusion: A Rapid Dissection Technique. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20131, doi: (2023).