Abstract
Kilde: Gervaise, A.L. og Arur, S. Spatial and Temporal Analysis of Active ERK in the C. elegans Germline. J. Vis. Exp. (2016).
Denne video beskriver en metode til at dissekere gonads fra voksne C. elegans hermafroditter, hvilket resulterer i væv, der er egnede til immunostaining og fluorescerende billeddannelse.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Gervaise og Arur, Rumlig og Tidsmæssig Analyse af Aktiv ERK i C. elegans Germline. J. Vis. Exp. (2016). 1. Dissektion af voksne orme til opnåelse af gonads Vælg 100 – 150 WT (N2) eller den ønskede genotype af orme på det ønskede og specifikke udviklingsstadium (L1, L2, L3, L4, voksen osv.)</…
Materials
| Flat bottom glass watch dish | Agar Scientific | AGL4161 | We use glass because dissected gonads often stick to plastic |
| 25 G needles | BD PrecisionGlide | 305122 | |
| Syringes (could be 1 or 5 mL) | BD Syringes | 1 mL: BD 309659 | |
| Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm) | Fisherbrand | 12-550-343 | |
| Clinical bench top centrifuge | |||
| *M9 solution | |||
| Levamisole | Sigma | L9756 | |
| *M9 Buffer Recipe | 3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L. |
Citar este artigo
C. elegans Gonad Extrusion: A Rapid Dissection Technique. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20131, doi: (2023).