Parring og æg iscenesættelse: En metode til at generere embryoner og sortere dem efter udviklingsstadium
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Hostelley T.L., et al. Prøveforberedelse og analyse af RNASeq-baserede genekspressionsdata fra zebrafisk. J. Vis. Exp. (2017)
Artiklen beskriver en protokol til at generere zebrafisk embryoner gennem naturlige parring og sortering deres udviklingsstadier. Protokollen anvendes yderligere til analyse af bugspytkirtel β-celler ved hjælp af transgene fisk.
Protocol
1. Generering af embryoner gennem naturlig parring Kulturfostre til 3 måneder, reproduktiv modenhed. Adskille voksne mandlige og kvindelige fisk fra den ønskede stamme i opdelt parring tanke om aftenen før embryon indsamling, og tilsæt 2 hanner og 3 hunner til hver tank.BEMÆRK:Brug af den transgene insulin2a:mCherry fluorescerende reporter stamme tilladt analyse af bugspytkirtel β-celler. Overfør fisk til parringstanken med ferskvand, og …
Materials
| ins2a:mCherry | ZIRC | ZL1483 | |
| Mating tanks 1.0L Crossing Tank Set | Aquaneering | ZHCT100 | |
| Dissecting Microscope | Zeiss |
Citar este artigo
Mating and Egg Staging: A Method to Generate Embryos and Sort Them by Developmental Stage. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20183, doi: (2023).