En Vivo Electroporación: un método específico del sitio para transfectar el pez cebra

Abstract

Fuente: Durovic, T., et al. Método de electroporación para la entrega in vivo de ADN plásmido en el telencéfalo adulto de pez cebra. J. Vis. Exp. (2019).

Este video describe la electroporación in vivo, que es una técnica para la entrega de ADN en células ependymogliales en peces cebra adultos.

Protocol

1. Electroporación Retire el pescado de la configuración de inyección mientras todavía lo sostiene en la esponja. Sumerja el lado interno de la punta de los electrodos en el gel de ultrasonido. Cubra el telencéfalo de pescado con una pequeña cantidad de gel de ultrasonido. Coloque la cabeza de pez entre los electrodos, colocando el electrodo positivo en el lado ventral de la cabeza del pez y el electrodo negativo en el lado dorsal(Figura 1C),mientras mantiene…

Representative Results

Figura 1: Representación esquemática de la sección coronal del telencéfalo de pez cebra. (A) Esquema de una sección coronal de telencéfalo de pez cebra, destacando la posición de las células ependymogliales, que recubren la superficie ventricular y construyen la pared ventricular ventral. La capa ependímica dorsal está puenteando los dos hemisferios y cubriendo el ventrículo (V), situado entre …

Materials

Ultrasound gel	SignaGel, Parker laboratories INC	15-60	Electrode Gel
BTX Tweezertrodes Electrodes	Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus	45-0486	1mm diameter
Electroporation device	BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus	45-0662