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Encyclopedia of Experiments

成人斑马鱼肠解剖:分析复合吸收的技术

Overview

该视频描述了分离肠道以评估生物活性化合物的肠道吸收的技术。在这个样本中,我们将从成年斑马鱼中分离出肠道,以分析免疫刺激剂的摄取量。

Protocol

1. 斑马鱼肠解剖

  1. 在指定时间段后插管(例如,5 h 和/或 24 h),将使用网的鱼放入 300 毫克/L 乙基 3-氨基苯甲酸酯甲烷硫酸酯 (MS-222) 安乐死解决方案中。确保操作库停止移动,并且没有尾部捏反射。五分钟通常就足够了。
  2. 拿起安乐死的动物用网,并将其放在过滤纸上。
    注: 滤纸非常有助于去除肠道沿线的粘合组织。
  3. 使用锋利的解剖剪刀,用细钳子将肛门切成半圆形切口,并打开切口。切开肠的两端,取出所有内脏,放在滤纸上。
    注意事项: 快速工作,以减少细胞代谢和死亡。
    注: 或者,去除PBS和冰上的粘合组织。
  4. 将肠道与内脏分离,确保保持其方向(前肠到后肠段),并伸展肠道。通常,肠前部比后段宽。解剖时注意获得所有的肠道。
    注: 后端是相当精细和脆弱的小鱼,并可能脱落,特别是在动物 <0.7 g.
  5. 用钳子将肠子卷在滤纸上,以便将粘合组织从肠道中分离出来。
  6. 继续为各种下游分析准备肠子

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
MS-222    Sigma Aldrich E10521 powder
10x PBS   Sigma Aldrich P5493
Filter paper   Filter-Lab RM14034252

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Tags

空值,问题,
成人斑马鱼肠解剖:分析复合吸收的技术
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资料来源:Jie J等人,成人斑马鱼口服管:生物活性化合物肠道吸收评估模型J. 维斯(2018).

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