Summary

İnsektisit Direnci İzleme için biyoanalizlere

Published: December 30, 2010
doi:

Summary

Bu makale, pestisit duyarlılık anket ve eklembacaklı zararlıları temas direnci ve sistemik böcek ilaçları tespit etmek için kullanılan teknikler gösteriyor ve tartışır.

Abstract

Pestisitler, yüksek verimli üretim tarımın ayrılmaz bir parçası çünkü Zararlı böcek böcek ilaçlarına karşı direnci artan bir sorundur. Birkaç ürünler, belirli bir ürün sistem içinde ayrı bir haşere etiketlenir, kimyasal kontrol seçenekleri sınırlıdır. Bu nedenle, aynı ürün (ler) tekrar tekrar kullanılabilir ve sürekli seçim basıncı hedef haşere yerleştirilir. Dirençli popülasyonların gelişimi ile ilgili mali ve çevresel maliyetleri vardır. Pestisit direnci maliyet Amerika Birleşik Devletleri'nde her yıl yaklaşık 1,5 milyar dolar olarak tahmin edilmiştir. Bu makale şu anda eklembacaklıların (özellikle böcekler) direnç gelişimi için nüfus izlemek için kullanılan protokoller, anlatacağız. Yetişkin flakon testi böcek irtibata toksisite ölçmek için kullanılır ve bu test bir değişiklik, bitki-sistemik böcek için kullanılır. Bu biyoanalizlere, böcekler teknik notu insektisit ve maruziyet sonrası belirli bir aralıkta kaydedilen yanıtlar (ölüm) maruz kalmaktadır. Mortalite verileri tahminleri, hedef nüfus ve bir dizi güven sınırları (CL) verileri değişkenlik tahminleri olarak% 50 (LC 50) ölüm sağlar ölümcül bir konsantrasyon oluşturmak için Günlük doz probit analizi tabi tutulur . Insektisit duyarlı nüfus bir dizi için bu verilerin toplandığı zaman, LC 50, gelecekteki izleme amaçları için temel veri olarak kullanılabilir . Popülasyonları ürünlere maruz kalmış sonra, sonuçlar aynı metodoloji kullanarak önceden belirlenen LC 50 mukayese edilebilir.

Protocol

1. Giriş Gıda üretimi, 2025 yılına kadar dünya nüfusu 8,04 milyar insan 1 ulaşacağı gerçekleştirilmesi son derece önemli hale gelmiştir . Şu anda üretilen gıda ürünlerinin daha büyük bir miktarda sağlamak için ihtiyaç olacaktır. Yeterli gıda temini gibi pestisitler gibi bitki koruma ürünlerinin miktar mahsul veriminin artırılması ve kalitesini korumak için kullanmadan yeteneğine sahip olmayacaktır. Pestisitler tarihi ve güncel güvene dayanarak, pestisit direniş örnekleri oluşmaya devam edecek ve bilimsel literatürde bildirilmiştir. Zararlı böcek böcek ilaçlarına karşı direnci, yüksek verimli ve kaliteli üretim tarım ürünleri ayrılmaz bir parçası olduğu için sorunludur. Ancak, aşırı ve / veya bir pestisit kötüye bitkisel üretim için zararlı olabilir direnç gelişimine yol açabilir. Zararlıları (yani, böcekler, yabani otlar, patojenler, vb.) Çeşitli mekanizmaları ancak direnç gelişimi için önemli bir itici faktör kayıtlı pestisit kullanımı için mevcut eylem bağımsız modları ile 1 eksikliği olan direnç gelişir. Birkaç ürünler, belirli bir ürün sistem içinde ayrı bir haşere etiketlenir, kimyasal kontrol seçenekleri sınırlıdır. Bu nedenle, aynı kimyasal (ler) tekrar tekrar kullanılan ve sürekli seçim basınç haşere üzerine yerleştirilir. Haşere tek bir yıl içinde birden fazla nesiller ve her nesil pestisit maruz kaldığında, bu sorunu daha da derinleştirdi. Direnç 2 ile ilgili mali ve enrivornmental maliyetleri vardır. Zararlı böcek direnç tatmin edici kontrolü sağlamak için gerekli yüksek oranları ve pestisit daha sık uygulamalar yol açar. Verim kayıpları hedef haşere kontrol başarısızlık nedeniyle pestisit kullanımının artırılması sonra da ortaya çıkması muhtemeldir. Pimentel 2 yıllık yaklaşık 1,5 milyar ABD doları olması, Amerika Birleşik Devletleri'ndeki pestisit direnci bu maliyetler tahmin ediyor . Haşere popülasyonlar arasında pestisit duyarlılık Anketler, böcek ilacı performans herhangi bir kayma tespit ve kimyasal kontrol stratejileri değiştirmek için bir erken uyarı sağlamak için proaktif bir yaklaşım. Genel IPM stratejilerini değiştirerek, belirli bir pestisit canlılığı da, tarım için dünya için yeterli gıda ve lif vermeye devam etmek için önemli olan, daha uzun olabilir. Bu yazıda, insektisit duyarlılık izlemek ve temas böcek yetişkin flakon test 3 kullanarak insektisit dirençli popülasyonların geliştirme ve bitki sistemik böcek 4 için bu testin bir değişiklik tespit etmek için kullanılan bir protokol anlatacağız. 2. Yöntemleri 2.1 Güvenlik Bildirimi Böcek ile ilgili doğru güvenlik önlemleri kullanmak önemlidir. Pestisitler dokunmadan önce uygun Kişisel Koruyucu Ekipman (KKE) Malzeme Güvenlik Bilgi Formu (MSDS) danışın. Laboratuvarlarda pestisit işleme özel laboratuvar personeli tarafından eğitim, herhangi bir biyoanalizlere çalışmadan önce gerekli olmalıdır. Yapımı 2.2 Stok Çözüm Insektisit aktif madde (AI) bir kaynaktan bilinen bir konsantrasyon stok solüsyonu geliştirin. Biyoassay tedaviler orijinal stok solüsyonu yapılacaktır olarak istenen tüm konsantrasyonları dahil. Bu çalışmada, 100 mg / ml solüsyon 100mls stok solüsyonu olarak geliştirilen olacak faiz için, ancak, herhangi bir konsantrasyonu bu ilk konsantrasyon sulandırılmış olabilir. Yüzde saflık göre tartılması gereken bir teknik notu AI miktarını ayarlayın. Tutar tartılır = (yapmak hacmi) X ([# mg / ml solüsyon] / [% purity/100]) Örneğin, teknik AI 10152.284 mg 100 ml,% 98.5 saflıkta bir teknik notu insektisit bir 100 mg / ml solüsyon yapmak gerekir: (100 ml) X ([100μg/ml] / 0,985) = 10.152,284 mikrogram 2.2.1 İletişim İnsektisitler Yetişkin Flakon Test Kısmen aseton ile bir ölçülü balona doldurmak ve ayarlanan miktarda insektisit AI tartmak. Tartmak tekne tüm insektisit kaldırmak için balonun içine ağırlık tekne aseton ile durulayın. Aseton ile mezuniyet hattına ölçülü balona doldurun. Çoğu çözümleri soğutmalı koşullarda gerçekleştirilen etkinlik yaklaşık bir ay boyunca kayda değer kaybı ile faaliyet devam edecektir. Sistemik İnsektisitler Yetişkin Flakon Testi 2.2.2 Modifikasyon Sistemik böcek böceklerin Zehirlenme temas ürünler farklı. Sistemik ürünler genellikle doğrudan exposur sahip böcek yerine aktif hale böcek tarafından alınması gerekire temas böcek gibi ürün. Bu nedenle, yetişkin flakon test, test edilecek sistemik böcek için güncellenmiştir. Stok çözümü için gerekli olan AI ağırlığı, bölüm 2.2 'de belirtilen e benzer hesaplanır. Su çözeltisi: metodolojisi, AI,% 10'luk bir kilo bal ile çözülür dışında benzer. Bu çözüm biyoassay başlandıktan 24 saat içinde yapılmalıdır. Aseton karışımı bal eklenir: teknik sınıf malzeme suda çözünebilir değilse, böcek ilacı, böcek ilacı çözüm yüksek bir konsantrasyon sadece küçük bir hacim gibi aseton ile yapılabilir su solüsyonu 4 . 2.3 Konsantrasyonlar Range belirlenmesi ve geliştirilmesi Konsantrasyonları Biyoassay yanıtların kurmak için gerekli olan uygun konsantrasyonlarının belirlenmesi zor olabilir. Birkaç tekrarlamalı konsantrasyonlarının aralığı tanımlamak için gerekli olabilir ve bu deneme yanılma yolu ile yapılır. Ayrıca, nüfusu duyarlılık düzeyleri değişiklik olursa aralığı zamanla değişebilir. Son konsantrasyonları kurarak çeşitli başka faktörler de göz önünde bulundurulmalıdır ve olmalıdır: böcek ailesi, böcek ilacı sınıfı, böcek boyutu, vs Daha önce yetişkin flakon testlerin sonuçları insektisit konsantrasyonları ilk seçim yardımcı olabilir yayınlandı. 15 Thripidae; Coleoptera: Brentidae 16, 17, Curculionidae Coccinellidae 18-19 ve Cybocephalidae 19; Diptera: Culicidae; Hemiptera: Thysanaptera Aleyrodiidae 5-6, Aphididae 7, Pentatomidae 8-10 ve Miridae 11-14 biyoanalizlere yayınlanmıştır 20; Lepidoptera: Tortricidae 21 ve Noctuidae 3, 22-26; Hymenoptera: Braconidae 7,18 Ichneumonidae 26-27, Aphidiidae 18, Encyrtidae 7, ve Aphelinidae 18. Konsantrasyonları "X" mikrogram / ml solüsyon göre yapılır. Ancak, şişeleri yetişkin flakon test için hazırlanan, sadece 0.5 ml her flakon eklenebilir; bu nedenle, flakonun konsantrasyonu yarım konsantrasyonu yapılır. Bir kez seçilen konsantrasyonları, aşağıdaki denklem çözüm tutarının belirlenmesinde yardımcı olabilir istenen konsantrasyona yapmak için eklenen. (C1) (V1) = (C2) (V2) C1 stok solüsyonu konsantrasyonu; C2 hazırlanmaktadır konsantrasyonu; V1 yeni konsantrasyon yapmak için gerekli stok hacmi ve V2 yeni konsantrasyon hacmi. Örneğin, bir 100μg/ml stok solüsyonu 5mls bir 5μg/ml bir 100mls yapmak için gereklidir. Bu 5μg/ml çözüm 2.5μg/vial bir konsantrasyon kaplı şişeleri neden olacaktır. 5mls = [(5μg/ml) (100mls)] / (100μg/ml) 2.3.1 İletişim İnsektisitler Yetişkin Flakon Test Kısmen istenen konsantrasyona yapmak için gerekli stok solüsyonu hesaplanan miktarı volumetrik flaks doldurun ve kısım. Ölçülü balona mezuniyet hattına aseton ile doldurun ve daha sonra kullanmak üzere buzdolabında saklanması için bölüm 2.4 veya mühür Parafilm M (Alcan Inc, Neenah, WI) ile devam edin. Çoğu çözümleri 1 ay boyunca iyi. Sistemik İnsektisitler Yetişkin Flakon Testi 2.3.2 Modifikasyon Bu süreç, aseton yerine su çözeltisi:% 10'luk bir kilo bal dışında daha önce 2.3.1 'de belirtildiği gibi aynıdır. Su solüsyonu istenen tüm konsantrasyonlarını yapmak için yeterli bal karıştırın. Bu çözümler hazırlanması 24 saat içinde kullanılmalıdır. Şişeler, 2.4 Hazırlık 2.4.1 İletişim İnsektisitler Yetişkin Flakon Test Konsantrasyonları buzdolabında saklanır olsaydı, ortam sıcaklığına kadar ısınmasını bekleyin. Insektisit konsantrasyonu etkileyebilir sıcaklığa bağlı aseton değişiklikler hacmi. Boya ya da kalem kullanarak konsantrasyonları için renk kodu 20 ml cam şişe (vidalı kapaklar için takılan). 0.5ml/concentration sunmak için yinelenen bir pipet ayarlayın. En düşük konsantrasyon ile takip eden ve tüm konsantrasyonlarda kullanılır kadar artan dozlarda devam aseton kontrolü ile çalışmak başlatın. Küçük bir beher tedavi edilmesi şişeleri gerçek sayı (yani, 40 şişeleri için 20mls) olarak yaklaşık yarım hacmi çözüm dökün. Çözüm kullanımda değilken, konsantrasyon değişikliklerine neden olabilir buharlaşmasını en aza indirmek için örtün. Yinelenen pipet içine böcek ilacı çözüm çizin ve bireysel cam şişe içine 0.5 ml çözüm dağıtmak. Tedaviden hemen sonra, cam şişe, ticari bir hot dog silindir üzerine yerleştirilir. Silindirleri teslimi olarak, cam şişeleri teknik notu insektisit ile kaplı flakon içine bırakarak, aseton buharlaşır döndürün ve. Isı d.egrade insektisit, bu nedenle ısı için kapalı olması önemlidir. Bu ısıtır ve aynı anda rulo ve aynı anahtarı ya da hot dog silindirin bağımsız ısıtma elemanı ve rulolar için anahtarları işleyen bir model kullanılarak kontrol edilir bir model üzerinde gözü kesme ya da yapılabilir. Rulo tutar daha fazla şişeleri tedavisinde kaçının; cam şişe döndürülür ve flakon duvarları düzgün bir kaplama alamayabilir önce aseton buharlaşması olabilir. Tüm aseton çekinceye kadar şişeleri döndürmek için izin verin. Belki aseton yoğunlaşma flakon duvarları ince bir tabaka vardır, bu nedenle, şişeleri tek tek incelenecek. Zaman laboratuar koşullarında dayalı şişeleri değişir rulo gereklidir. Şişeleri, kuru, kap ve ya da soğuk ve karanlık ortamlarda saklayın. Böcekler kapaklarındaki flakonun dudak (örneğin, tedavi edilen yüzeylerin kaçınarak) altında asılı konik gömlekleri veya yırtılmış folyo gömlekleri ile dinlenme gözlenmiştir; bu nedenle, un-kaplı kapaklar kullanılması önemlidir. Şişeleri hazırlamak için kullanılan herhangi bir kalan çözüm düzgün bir şekilde bertaraf edilmelidir. Ölçülü balona kalan çözüm Parafilm ile mühürlü ve buzdolabında saklanabilir. Farklı böcek farklı raf ömrü var, çünkü onlar hazırlanan şişeleri tarih. Örneğin, pyrethroid kaplı şişeleri, yaklaşık bir ay için iyi bir organofosfat gibi, daha istikrarsız bir insektisit ile kaplı şişeleri ise, iki hafta veya daha uzun raf ömrüne sahiptir. Sistemik İnsektisitler 2.4.2 Modifiye Yetişkin Flakon Test Floral köpük böcekler 4 insektisit çözüm sunmak için bir substrat olarak hizmet vermeye ihtiyaç vardır. Bir mantar delici kullanarak çiçek köpük (12mm x 12mm) parçalara kesin. Daha önce açıklanan cam şişe içine çiçek köpük bir parçası. 0.5 ml çözüm sunmak ve çiçek köpük üzerine dağıtmak için ayarlanabilir yinelenen pipet doldurun. Bu sıvı hacmi çiçek köpük parçasının doyurabilecek, ancak flakonda köpük seviyesini geçmemelidir. Ve yüksek konsantrasyonlarda düşük kontrolü (su solüsyonu sadece kilo bal% 10): Yine sırayla çalışır. 2.5. Depolama şişeler 2.5.1 İletişim İnsektisitler Yetişkin Flakon Test Insektisit kaplı şişeleri saklarken, insektisit özelliklerini biliyoruz. Farklı böcek gibi farklı depolama gereksinimleri vardır: piretroitler ışığa karşı duyarlıdır ve oda sıcaklığında değil, karanlıkta saklanabilir, ancak ısıya duyarlı organofosfat böcek ve bir derin dondurucuda saklanması gerekir. Böcek dondurucuda saklanabilir gerekiyorsa, bu böceklerin açığa önce oda sıcaklığına kadar ısıtılmalıdır gerekir. 2.6 Biyoassay Test edilecek böcekler toplayın. Bu süreç, feromon tuzakları,-baited süpürme ağlar, ya da başka herhangi bir kitle yakalama aracı kullanılarak yapılabilir. Bu dönemde gıda ve nem kaynağı sağlamak; Böcekler toplama işlemi sırasında yaralanmış olanlar için doğal bir ölüm meydana olanak sağlamak için 8 – 24 saat için düzenlenen olmalıdır. Büyük test edilen böceklerin sayısı, daha sağlam bir veri kümesi olacaktır; konsantrasyonu ortalama 10-25 böcekler (en az) 10 sınayın. Biyoassay böcekler seçerken, sağlıklı, aktif bireyler seçin ve uyuşuk veya anormal bireyler atın. Onlar tam konsantrasyonları ve bir seferde sadece bir konsantrasyon maruz kaldığı bu tür şişeleri yerleştirin böcekler. Bu prosedür, birinde en sağlıklı ve aktif bir birey ya da bir kaç konsantrasyonları yerleştirerek önlemek. Ayrıca, başına 10 böceklerin konsantrasyonu minimum deney yapmak mümkün değilse, her bir konsantrasyon için mümkün olduğunca çok maruz. Sonra, kısa bir süre içinde aynı örnek alan (iki-üç hafta) daha fazla böcekleri toplamak ve deney tekrarlayın. Bazı böcekler, bitki sezon ilerledikçe duyarlılık (direnç inşa) kaybedebilir; nedenle, erken bahar aylarında toplanan bireylerin yanıt, sonbaharda 28 toplanan bu farklı olabilir. Mortaliteyi değerlendirmek için ölçütler geliştirin. , Can çekişen veya ölü olarak böcekler sınıflandırmak için kullanılan en yaygın olarak kullanılan ölçüt, koordineli hareket eksikliği. Bu gözlemler, 1m veya künt bir alet ile hafifçe kışkırtılması koordineli hareket eksikliği koordine uçuş sürdürmek mümkün dorsal yüzey üzerine yerleştirilir, kendisini sağ yetersizlik içerebilir. Bireysel bir hak değil üzerine düştüğünde ise, koordineli bir hareket var; böcek ölü olarak kabul edilmelidir. Böcek kaygan bir yüzey üzerinde kendini düzeltilmesi sorunlarla karşılaşabilirsiniz; kendisi sağ için gerekli çekiş gücü elde etmek mümkün olduğunu, bu nedenle, belki de gerekli olan böcek, bir yüzey sağlamak için. Numarasını kaydedin.kurtulanlar ve her bir konsantrasyon için hayatta kalma hesaplamak için ölü bireyler. 2.6.1 İletişim İnsektisitler Yetişkin Flakon Test Böcek (ler) şişenin içine yerleştirin ve kapağı gevşek güvenli. Böcek kapağı kaçmasını önlemek gerekir, ama hava akışına izin vermek için yeterince gevşek olmalıdır. Çoğu böcek biyoanalizlere için, sadece tek bir böcek her flakonda yerleştirilir; Ancak, küçük böcekler, örneğin limonluk veya Thrips, flakon, 6, 15 ortalama olarak 30 kadar bireylerin bir oranda maruz kalabilirsiniz. Böcekler biyoassay uç noktada mortalite açısından değerlendirildi kadar oda sıcaklığında dik şişeleri yerleştirin. Pozlama süreleri, türler ve muhtemelen insektisit 3,5-27 farklılık gösterebilir . Yeni bir böcek veya kimyasal ile ilk toksik seviyeleri kurma süreci, maruz kaldıktan sonra birden fazla tarifeli zaman noktalarında nesneleri izlemek. Sınavlar yüksek hayatta kalma (<% 10 mortalite) hala olmayan insektisit tedavi kontrolü korurken yüksek konsantrasyon mortalite% 100 olduğu zaman sona erdirilebilir. % 100 ölüm kontrolü yüksek hayatta kalma ile en yüksek konsantrasyonda elde değilse, biyoassay yüksek konsantrasyonlarda bir dizi kullanarak tekrar edilmelidir. İdeal olarak, mortalite düzeyleri insektisit konsantrasyonu arttıkça artar. Bazı böcekler, 24 saat boyunca maruz kaldığında, nem kaynağı (yani, bitki materyali küçük bir parça) 12 gerektirir. Hassas bir böcek ile çalışırken, bu böcek, nem kaynağı olmaksızın yetişkin flakon test insektisit maruziyeti öncesinde flakon hayatta nasıl uzun belirlemek için faydalıdır. Bu bilgiler ile bir şişe ve bir nem kaynağı olmadan böcek yerleştirerek ve gerçek insektisit araştırmaları yapmadan önce, zaman içinde hayatta kalma izleme tarafından tespit edilebilir. 2.6.2 Modifiye Yetişkin Flakon Test Sistemik İnsektisitler Insektisit yokluğunda su çözeltisi: böcek bal ile doymuş çiçek köpük yem ve hayatta eğer biyoassay başlamadan önce belirlemek. Sadece su (veya bal:: suda çözünür olmayan teknik notu insektisit ile konsantrasyonlarının hazırlanmasında kullanılan aseton büyük miktarlarda su) çiçek köpük flakonlarda Yeri böcekler bal ile doymuş ve birkaç gün boyunca hayatta kalma izlemek. Yetişkin flakon testi Bu değişiklik sadece bir Miridae 4 ve Pentatomidae 29 ile incelenmiş olup, bu nedenle, test süresinin belirlenmesinde iletişim insektisit biyoassay için daha fazla deney gerektirir. Örneğin, Lygus lineolaris (Palisot de Beauvois'da) thiamethoxam için maruz kaldıktan sonra 24 saat mortalite açısından değerlendirilir, ancak imidacloprid 4 için 72 saat . Oebalus pugax F. mortalite dinotefuran 29 maruz kaldığında 96 saatte değerlendirildi. Bu nedenle, kontrol şişelerini böcek hayatta kalma yapılabilir insektisit intoksikasyonu doğru bir ölüm derece önce birkaç gün boyunca sürekli yüksek olmalıdır. Böcek (ler), doymuş bir çiçek köpük sintilasyon şişenin içine yerleştirin. Kapaklı şişeleri sızdırmazlık yerine, bir parça pamuk ile şişeleri mühür. Böcekler mortalite açısından değerlendirildi kadar oda sıcaklığında dik şişeleri yerleştirin. Daha önce de belirtildiği gibi, düzenli aralıklarla oranı ölüm. Kontrolü yüksek hayatta kalma (<% 10 mortalite) ile en yüksek konsantrasyonda% 100 ölüm varken Sınav sona erdirilebilir. Ek konsantrasyonları test etmek için gerekli olabilir. 2.6.3 Veri Analizi Abbott 30 göre bir formül kullanarak kontrol tedavisinde mortalite için düzeltin. Düzeltilmiş ölüm oranı (%) = ((% hayatta kalma kontrolü -% sağkalım tedavi) /% hayatta kalma kontrolü) x 100 Günlük Doz probit kullanarak, nüfusun% 50 (LC 50) öldürmek ve% 95 güven aralığı (CL) kurmak için gerekli olan ölümcül konsantrasyonunu belirlemek için verileri analiz . LC 50 (PROC, değişkenler 31, Polo-Plus 32 SAS) belirlemek için birden fazla yazılım programları mevcuttur. 3. Notlar İş akışı olumsuz hava başlığı altında aseton ve böcek. Hacimsel şişeler doldururken, aseton iki yıkama şişeleri için en iyisidir. Bir yıkama şişesi, hızlı sıvılar teslimat ve yavaş teslimat için adapte edilmiştir. , Daha büyük bir açılış oluşturmak için teslim kol bölümünü kaldırın ve bu şişe, hızlı teslimat için büyük bir hacim kullanılabilir. Aseton mezuniyet hattı, değişim şişeleri yaklaşıyor ve sürülür tutarı üzerinden daha fazla denetime sahip, böylece daha yavaş teslimat ile yıkama şişesi kullanın. Mezuniyet çizgi üstü bir şişe dolu ise, üst kapalı bırakın ve aseton mezuniyet hattı için buharlaşmasına izin verir. Miktarı Not neeşişesi kaplıyorsa, konsantrasyon, yani hazırlamak için gerekli stok solüsyonu ¾ yolu ded ancak 30mls eklemek gerekir, mezuniyet hattı üzerinden gidebilirsiniz.

Discussion

LC 50 değeri bir hedef nüfus (ler) bazal duyarlılık olarak kurmak için kullanılabilir. Bu verilerin değeri, gelecekteki izleme araştırmaları veya kaymıştır hedef nüfusun duyarlılığı belirlemek için önceden belirlenmiş LC 50 olduğu mevcut sonuçlarını karşılaştırarak hemen amaçlı olabilir . Gerçek LC 50 değerleri% 95 güven aralıkları inceleyerek popülasyonlar arasında karşılaştırıldığında; üst ve alt sınırları örtüşme yoksa, o zaman nüfus yatkınlık ve bazı durumlarda önemli bir değişiklik yaşanmıştır muhtemeldir direnç bir göstergesidir . 33. LC 50 s insektisit esusceptibilitye 28 mevsimsel değişiklikler de incelemek ya da türler veya insektisit AI s arasında cevapları karşılaştırmak için kullanılır Önemli bir çalışma, erkekler ve kadınlar 10 ya da yetişkinler arasında ve olgunlaşmamış aşamaları, 10,34 arasında da cevapları karşılaştırmak için bu verileri kullanabilir . Bazen güven aralıkları hesaplanacak geniş ya da değil. Sıkı güven aralıkları kazanmak için daha fazla böcek ve / veya daha fazla konsantrasyonları ile biyoassay yürütüyoruz.

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cotton Incorporated Devlet Destek Programı # 08-317MO, USDA / CSREES SR-IPM Hibe 2009-34103-20018 ve Landis Uluslararası Biz bu yayın ilgili finansman araştırma için teşekkür etmek istiyorum.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
50-100 ml glass beaker        
Volumetric flask with stoppers (can use the amber colored flasks for light sensitive pesticides such as pyrethroids)        
20ml glass scintillation vials with un-lined lids        
A method for color coating vials (paint or markers)        
Acetone        
Commercial hotdog roller (heat element disconnected)        
2 wash bottles (one modified such that the opening is large for fast delivery of the liquid and one so that the spout opening is small for slow delivery of the liquids)        
Small weigh boat (make sure all plastic materials acetone safe)        
Access to a balance with 0.001g readability or a higher precision.        
Parafilm M        
Repeater pipettor        
Appropriate tips        
Glass pipettes that fit in the volumetric flask.        
Hood (used to remove the acetone smell)        
A place to store insecticide solutions and vials [refrigerator (solutions), dark room or freezer depending on the chemical (vials)]        

Referências

  1. Yu, S. J. . The Toxicology and Biochemistry of Insecticides. , (2008).
  2. Pimentel, D. Environmental and Economic Costs of the Application of Pesticides Primarily in the United States. Environ. Dev. Sustain. 7, 229-252 (2005).
  3. Plapp, F. W., McWhorter, G. M., Vance, W. H., H, W. Monitoring for pyrethroid resistance in the tobacco budworm in Texas-1986. Proceedings Beltwide Cotton Production Research Conferences. , (1987).
  4. Prabhaker, N., Toscano, N. C., Henneberry, T. J., Castle, S. J., Weddle, D. Assessment of two bioassay techniques for resistance monitoring of silverleaf whitefly (Homoptera: Aleyrodidae) in California. J. Econ. Entomol. 89, 805-815 (1996).
  5. Sivasupramaniam, S., Johnson, S., Watson, T. F., Osman, A. A., Jassim, R. A. glass-vial technique for monitoring tolerance of Bemisia argentifolii (Homoptera: Aleyrodidae) to selected insecticides in Arizona. J. Econ. Entomol. 90, 66-74 (1997).
  6. Shean, B., Cranshaw, W. S. Differential susceptibilities of green peach aphid (Homoptera: Aphididae) and two endoparasitoids (Hymenopera: Encyrtidae and Braconidae) to pesticides. J. Econ. Entomol. 84, 844-850 (1991).
  7. Willrich, M. M., Leonard, B. R., Cook, D. R. Laboratory and field evaluations of insecticide toxicity to stink bugs (Heteroptera Pentatomidae). J. Cotton Sci. 7, 156-163 (2003).
  8. Snodgrass, G. L., Adamczyk, J., Gore, J. Toxicity of insecticides in a glass-vial bioassay to adult brown, green, and southern green stink bugs (Heteroptera: Pentatomidae). J. Econ. Entomol. 98, 177-181 (2005).
  9. Nielsen, A. L., Shearer, P. W., Hamilton, G. C. Toxicity of insecticides to Halyomorpha halys (Hemiptera: Pentatomidae) using glass-vial bioassays. J. Econ. Entomol. 101, 1439-1442 (2008).
  10. Dennehy, T. J., Russell, J. S. Susceptibility of Lygus bug populations in Arizona to acephate (Orthene) and bifenthrin (Capture) with related contrasts of other insecticides. Proceedings Beltwide Cotton Conferences. , (1996).
  11. Snodgrass, G. L. Glass-vial bioassay to estimate insecticide resistance in adult tarnished plant bugs. Heteroptera: Miridae). J. Econ. Entomol. 89, 1053-1059 (1996).
  12. Snoddgrass, G. L., Scott, W. P. A discriminating-dose bioassay for detecting pyrethroid resistance in tarnished plant bug ( Heteroptera: Miridae) populations. Southwest. Entomol. 24, 301-307 (1999).
  13. Lopez, J. D., Hoffman, W. C., Latheef, M. A., Fritz, B. K., Martin, D. E., Lan, Y. Adult vial bioassay of insecticidal toxicity against cotton fleahopper, Pseudatomoscelis seriatus (Hemiptera: Miridae). J. Pest. Sci.. 33, 261-265 (2008).
  14. Lopez, J. D., Hoffman, W. C., Latheef, M. A., Fritz, B. K., Martin, D. E., Lan, Y. Evaluation of toxicity of selected insecticides against thrips on cotton in laboratory bioassays. J. Cotton Sci. 12, 188-194 (2008).
  15. Smith, T. P., Hammond, A. M. Comparative susceptibility of sweetpotato weevil (Coleoptera: Brentidae) to selected insecticides. J. Econ. Entomol. 99, 2024-2029 (2006).
  16. Kanga, L. H. B., Wall, M. L., Plapp, F. W., Gardiner, E. M. M. Pyrethroid resistance in field-collected boll weevils from southeast Arkansas in 1994. Southwest. Entomol. 20, 247-253 (1995).
  17. Bayoun, I. M., Plapp, F. W. J. r., Gilstrap, F. E., Michels, G. J. Toxicity of selected insecticides to Diuraphis noxia (Homoptera: Aphidiae) and its natural enemies. J. Econ. Entomol. 88, 1177-1185 (1995).
  18. Smith, T. R., Cave, R. D. Pesticide susceptibility of Cybocephalus nipponoicus and Rhyzobius Iophanthae (Coleoptera Cybocephalidae, Coccinellidae). Fla. Entomol. 89, 502-507 (2006).
  19. Sukontason, K., Olson, J. K., Hartberg, W. K., Duhrkopf, R. E. Organophosphate and pyrethroid susceptibilities of Culex salinarius adults from Texas and New Jersey. J Am. Mosquito Contr. 14, 477-480 (1998).
  20. Kanga, L. H. B., Plapp, F. W. J. r., Wall, M. L., Elzen, G. W., Lopez, J. Monitoring for resistance to organophosphorus, carbamate, and pyrethroid insecticides in the oriental fruit moth (Lepidoptera: Torticidae). Canadian Entomol. , 131-441 (1999).
  21. Plapp, F. W., Jackman, J. A., Campanhola, C., Frisbie, R. E., Graves, J. B., Luttrell, R. G., Kitten, W. F., Wall, M. Monitoring and management of pyrethroid resistance in the tobacco budworm (Lepidoptera: Noctuidae) in Texas, Mississippi, Louisiana, Arkansas, and Oklahoma. J. Econ. Entomol. 83, 335-341 (1990).
  22. Mink, J. S., Boethel, D. J., Leonard, B. R. Monitoring permethrin resistance in soybean looper (Lepidoptera: Noctuidae) adults. J. Entomol. Sci. 28, 43-50 (1993).
  23. Cook, D. R., Leonard, B. R., Gore, J., Temple, J. H. Baseline responses of bollworm, Heliocoverpa zea (Boddie), and tobacco budworm, Heliothis virescens (F.), to indoxcarb and pyridalyl. J. Agricul. Urban Entomol. 22, 99-109 (2005).
  24. Temple, J. H., Pommireddy, P. L., Cook, D. R., Maçon, P., Leonard, B. R. Arthopod management: Susceptibility of selected lepidopteran to pests Rynaxypyr, a novel insecticide. J. Cotton Sci. 13, 23-31 (2009).
  25. Plapp, F. W., Vinson, S. B. Comparative toxicities of some insecticides to the tobacco budworm and its ichneumonid parasite, Campoletis sonorensis. Environ. Entomol. 6, 381-384 (1977).
  26. Xu, J., Shelton, A. M., Cheng, X. i. a. N. i. a. n. Variation in susceptibility of Diadegma insulare (Hymenoptera: Ichneumonidae) to permethrin. J. Econ. Entomol. 94, 541-546 (2001).
  27. Snodgrass, G. L., Scott, W. P. Seasonal changes in pyrethroid resistance in tarnished plant bug (Heteroptera: Miridae) populations during a three year period in the delta area of Arkansas, Louisiana and Mississippi. J. Econ. Entomol. 93, 441-446 (2000).
  28. Miller, A. L. E., Way, M. O., Bernhardt, J., Stout, M. J., Tindall, K. V. Multi-state resistance monitoring of rice stink bug with a new and old insecticide. , (2010).
  29. Abbott, W. S. A method for computing the effectiveness of an insecticide. J. Econ. Entomol. 18, 265-267 (1925).
  30. . . User’s Manual version 8.0. , (2002).
  31. . . A user’s guide to Probitor Logit analysis. , (2002).
  32. Preisler, H. K., Robertson, J. L. . Pesticide bioassays with arthropods. , (1992).
  33. Hollingsworth, R. G., Steinkraus, D. C., Tugwell, N. P. Responses of Arkansas population of tarnished plant bugs (Heteroptera: Miridae) to insecticides, and tolerance differences between nymphs and adults. J. Econ. Entomol. 90, 21-26 (1997).

Play Video

Citar este artigo
Miller, A. L., Tindall, K., Leonard, B. R. Bioassays for Monitoring Insecticide Resistance. J. Vis. Exp. (46), e2129, doi:10.3791/2129 (2010).

View Video