Protozoa Termit Gut Karşı Ligandla litik Peptitler Protozoacidal Aktivitesi Test In vitro (Protozoa Kültür) ve In vivo (Mikroenjeksiyon içine Termit Hindgut)
Summary
Ligandlar protozoa Formosan litik peptitler ile birleştiğinde floresan mikroskopi ve bu ligandlar kullanılarak yeraltı termitler bağırsak protozoa öldürmek selüloz sindiren bu yüzey membran bağlamak gösteren prosedürleri mevcut<em> In vitro</em> (Anaerobik protozoa kültürü) ve<em> In vivo</em> (Termit hindgut içine enjeksiyon).
Abstract
Biz kimyasal pestisit kullanımı konusunda daha az güven yol açacak yeraltı termit kontrol etmek için yeni bir yaklaşım geliştirmektedir. Yeraltı termitler, ahşap sindirmek için verimli işçi hindguts protozoa bağlıdır. Parçalayıcı peptidler, protozoa parazitleri (Mutwiri ve ark 2000) çeşitli öldürmek için gösterilen ve aynı zamanda Formosan yeraltı termit, Coptotermes formosanus (Husseneder ve Collier 2009) bağırsak protozoa olmuştur . Parçalayıcı peptidler ökaryotlar nonspesifik bağışıklık sisteminin bir parçasıdır ve mikroorganizmalar (Leuschner ve Hansel 2004) membranlar yok. En litik peptidler, onlar daha yüksek ökaryotlar (Javadpour ve ark 1996), elektriksel olarak nötr kolesterol içeren hücre zarlarının etkilemez çünkü daha yüksek ökaryotlar zarar vermek olası değildir. Parçalayıcı peptid eylem ek bir ligand tarafından belirli bir hücre tipleri için hedef olabilir. Örneğin, Hansel ve ark (2007), tek başına veya non-spesifik peptitler ile konjuge litik peptidler etkili olurken, kanser hücre zarı reseptörü ligandlar ile konjuge litik peptidler, meme kanseri hücrelerini yok etmek için kullanılan olabilir olduğunu bildirdi. Parçalayıcı peptidler de, prostat ve testis kanseri hücreleri (Leuschner ve Hansel 2004) hedeflenen yıkımı için tümör hücrelerinin reseptörlerine bağlanır hormonları konjuge edilmiştir.
Bu yazıda, bağırsak Formosan yeraltı termit protozoa yüzey membran bağlanır heptapeptide ligand birleştiğinde bir litik peptid (Hekate) protozoacidal faaliyet göstermek için kullanılan teknikler mevcut. Bu teknikler ekstirpasyonu termit işçilerden gut, gut anaerobik kültür (Pseudotrichonympha grassii, Holomastigotoides hartmanni, protozoa
Spirotrichonympha leidyi), mikroskobik onay ligand floresan boya ile işaretlenmiş, tek hücreli canlılar ve değil, bakteri ya da bağırsak dokusu protozoa serbest yaşayan diğer termit gut bağlanır. Ayrıca parçalayıcı bir peptide aynı ligand verimli,, in vitro (protozoa kültürü) ve in vivo (işçi hindgut içine mikroenjeksiyon) protozoa termit gut öldürür, ama yalnız litik peptid daha az bacteriacidal olduğunu göstermektedir . , En az iki hafta içinde termitler ölümü protozoa yol açar kaybı.
Gelecekte, termit gut protozoa öldürmek ve daha sonra koloninin termitler öldürecekti ligand litik peptidler ifade etmek için "Truva Atları" gibi bir termit kolonisi ile termit hindgut ve yayılması hayatta mikroorganizmaların genetik mühendisi olacak . Ligand-litik peptidler protozoa parazitlere karşı ilaç geliştirme için de yararlı olabilir.
Protocol
Discussion
(Hansel ve Leuschner 2004, Hansel ve ark 2007) kanser hücrelerinin etkin bir şekilde hedef ve yok etmek için ligand-litik peptidler başarıyla kullanılmaktadır. Bu kavram üzerine kuruludur, biz yüzeyine bağlanan heptapeptide ligand geliştirdi Formosan yeraltı termitler bağırsak protozoa ve bu, termit ulaşmak için, termitler, bağırsak bu zorunlu selüloz sindiren symbionts yok etmek amacı ile bir litik peptide birleştiğinde kontrol (Husseneder ve Collier 2009).
Bi…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz floresan ligand sentezi, Biyoteknoloji Araştırma Interdisciplinaray Merkezi, ligand-litik peptid sentezi için UF ve floresan mikroskoplar erişim sağlamak için Socolovsky Mikroskop tesisi için LSU peptid tesisin eski müdürü Dr. Allison Richard teşekkür ederim. Finansman Savunma Bakanlığı SERDP Keşif Kalkınma Programı (TOHUM), Enerji ve Çevre Koruma Ajansı Bölümü, Biyoteknoloji AgCenter Disiplinlerarası Takım Programı ve Louisiana devlet tarafından sağlanmıştır.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Sigmacote | Sigma Aldrich | SL-2 | ||
| EDANS | Novabiochem | |||
| Anaerobic glove box | Coy Laboratories, Inc. | Custom made | ||
| Intellus environmental controller | Percival | I36NL | ||
| PC-10 Glass micropipette puller | Narishige Scientific Instrument Lab | PC-10 | ||
| Glass needles (Model GD-1, 1 X 900 mm) | Narishige Scientific Instrument Lab | GD-1 | ||
| Leitz micromanipulators | Vermont Optechs, Inc. | ACS01 | ||
| Microinjector | Tritech Research, Inc. | MINJ-1 | ||
| Microcaps | Drummond Scientific Company | 1-000-0005 | ||
| LEICA fluorescence imaging system | Leica | DMRxA2 | ||
| LEICA dissecting scope | Leica | MZ16 | ||
| LEICA microscope | Leica | DMLB | ||
| Olympus dissecting scope | Olympus | SZ61 |
Referências
- Hansel, W., Leuschner, C., Enright, F. Conjugates of lytic peptides and LHRH or βCG target and cause necrosis of prostate cancers and metastases. Mol. Cell. Endocrinol. 269, 26-33 (2007).
- Husseneder, C., Collier, R. E., Bourtzis, K., Miller, T. A. Paratransgenesis for termite control. Insect Symbiosis. 3, 361-376 (2009).
- Husseneder, C., Grace, J. K., Oishi, D. E. Use of genetically engineered bacteria (Escherichia coli) to monitor ingestion, loss and transfer of bacteria in termites. Curr. Microbiol. 50, 119-123 (2005).
- Husseneder, C., Grace, J. K. Genetically engineered termite gut bacteria deliver and spread foreign genes in termite colonies. Appl. Microbiol. Biotechnol. 68, 360-367 (2005).
- Javadpour, M. M., Juban, M. M., Lo, W. C., Bishop, S. M., Alberty, J. B., Cowell, S. M., Becker, C. L., Mc Laughlin, M. L. De novo antimicrobial peptides with low mammalian cell toxicity. J. Med. Chem. 39, 3107-3113 (1996).
- Lai, P. Y., Tamashiro, M., Fuji, J. K. Abundance and distribution of the three species of symbiotic protozoa in the hindgut of Coptotermes formosanus (Isoptera). Proc. Haw. Entomol. Soc. 24, 271-276 (1983).
- Leuschner, C., Hansel, W. Membrane disrupting lytic peptides for cancer treatments. Curr. Pharm. Des. 10, 2299-2310 (2004).
- Mutwiri, G. K., Henk, W. G., Enright, F. M., Corbeil, L. B. Effect of the Antimicrobial Peptide, d-Hecate, on Trichomonads. J. Parasitol. 86, 1355-1359 (2000).
- Trager, W. The cultivation of a cellulose-digesting flagellate, Trichomonas termopsidis, and of certain other termite protozoa. Biol. Bull. 66, 182-190 (1934).
