Colon ascendens Stent peritonit (Casp) är en mycket standardiserad modell för Polymikobiella buken sepsis hos gnagare. Den här artikeln beskriver kirurgiska ingreppet för Casp. Den Casp modellen och dess varianter tillåter systematisk undersökning av olika problem som rör ämnet sepsis.
Sepsis är ett ihållande problem på intensivvårdsavdelningar i hela världen. Att förstå de komplexa mekanismerna av sepsis är en förutsättning för att etablera nya behandlingsmetoder på detta område. Därför djurmodeller krävs som kan nära efterlikna den mänskliga sjukdomen och också tillräckligt itu med vetenskapliga frågor. Colon ascendens Stent peritonit (Casp) är en mycket standardiserad modell för Polymikobiella buken sepsis hos gnagare. I denna modell är en liten stent inopererad i colon ascendens hos möss eller råttor som leder till en kontinuerlig läckage av tarmbakterier in i bukhålan. Förfarandet medför bukhinneinflammation, systemisk bakteriemi, orgel infektion av tarmbakterier och systemisk men också lokala utsläpp av flera pro-och anti-inflammatoriska cytokiner. Den dödlighet av Casp kan kontrolleras genom att diametern på de infogade stent. En variant av denna modell, den så kallade Casp med intervention (CASPI), höjer möjlighet att ta bort septisk fokus genom en andra operation enligt gemensamma förfaranden i klinisk praxis. Casp är en lätt Lärbar och mycket reproducerbar modell som nära efterliknar det kliniska förloppet av buken sepsis. Det leder sätt att studera frågor inom flera vetenskapliga områden, t.ex. immunologi, infectiology, eller operation.
Casp är en Polymikobiella modell av buken sepsis som uppfyller de flesta kriterier antagits för en värdefull sepsis modell: Casp kan utföras i små djur, är mycket reproducerbar, lätt att övervaka av standard parametrar, ger goda läsa upp möjligheter och nära härmar kliniska inställningar buken sepsis. I en jämförande studie kunde vi visa att Casp leder till diffus peritonit med tidig och stadigt ökande systemisk infektion och inflammation (systemisk inflammatorisk respons syndrom), medan cecal ligation och punktering (CLP) visar en modell av intraabdominell abscess bildning med bibehållen och mindre tecken på systemisk inflammation (1). Tekniken att CASPI presenterar en möjlighet att simulera det kliniska förloppet vid peritonit med varandra kirurgiska fokus sanitet, vilket är den viktigaste terapeutiska principen i människan. Casp kan användas för alla frågor runt sepsis eller peritonit och är därför användbart för alla discipliner arbetar med sepsis forskning, exempelvis immunologi, farmakologi, kirurgi, intensivvård medicin, etc. Ett urval av publikationer om olika ämnen av sepsis med Casp modell ges nedan (1-14).
Vid start med Casp bör man vara medveten om att vissa metoder är nödvändigt för att utföra operationen exakt och snabbt. Kirurgisk erfarenhet kan vara till hjälp men är inget krav. Vi rekommenderar upptäckt av letality som en parameter för korrekt utförande av Casp. Man bör börja med 14G Casp som en stor stent är lättare att hantera än en tunnare. En utbildad Casp kirurgen kunna driva en mus inom 10 minuter. Innan något experiment, bör du se till att du är nära den perioden. När du fått lite erfarenhet med det kirurgiska ingrepp, bör du göra en överlevnad kinetisk att kolla dina kunskaper. 14G Casp bör resultera i en 100% dödlighet. Nybörjare i vårt laboratorium måste bevisa att de kan generera en 100% dödlighet med 14G Casp innan de börjar med experiment. Dessutom, bakteriologi och mätningar cytokin bör utföras för att verifiera sepsis. Om du har problem i början med mikrokirurgisk steg Casp, kan användning av förstoringsglas eller en kirurgisk mikroskop vara till hjälp. Men i princip kan Casp väl utföras utan de här verktygen. För återgivning av vår överlevnad är det absolut nödvändigt att samma material, särskilt stentar (BD Venflon, se nedan), används. Annars betydande variationer i resultaten är möjliga. Dessutom föreslår vi att det kan finnas variationer i resultaten beroende på till exempel individualitet kirurgen. Bör dock påverkan av faktorer som att vara liten.
Sammanfattningsvis är Casp ett praktiskt, enkelt reproducerbar och värdefulla sepsis modell som härmar nära den kliniska situationen i buken sepsis. Det är därför lämpligt för alla områden av sepsis forskning.
The authors have nothing to disclose.
Författarna tackar Nico Zantl, Klaus Pfeffer, och Bernhard Holzmann. Denna studie fick stöd av Deutsche Forschungsgemeinschaft, Bonn-Bad Godesberg, Tyskland (GRK-840, Vo 450/10-1).
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Narcotic fluid | Mix 0.5 mL Rompun with 4.0 mL Ketanest, and add 5.5 mL of saline solution (0.9%). For complete anesthesia, inject intraperitoneally 10 μL/g body weight | |||
Rompun (20 mg/ml Xylazine) | Bayer AG 51368 Leverkusen, Germany | |||
Ketanest (25mg/ml Esketamine) | Pfizer Pharma GmbH, 10785 Berlin, Germany | 647028001E | ||
BD Venflon 18GA (1,2x45mm, 80ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391457 | ||
BD Venflon 16GA (1,7x45mm, 180ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391455 | ||
BD Venflon 14GA (2,0x45mm, 270ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391456 | ||
Catgut Polyester 4/0 white, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 17218113 | ||
Mariderm black 7/0, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 18104900 |