اليرقات الزرد تمثل نموذجا الفقاريات أول نظام للسماح في وقت واحد تسجيل المشبك التصحيح من العضلات والخلايا العصبية الحركية ، الهدف العمود الفقري والهيكل العظمي. هذا الفيديو يوضح الطرق المجهرية المستخدمة لتحديد سقف قطعي السيارات بين الخلايا العصبية والخلايا العضلية المستهدفة فضلا عن منهجيات للتسجيل من كل نوع من الخلايا.
اليرقات الزرد تمثل نموذجا الفقاريات أول نظام للسماح في وقت واحد تسجيل المشبك التصحيح من العضلات والخلايا العصبية الحركية ، الهدف الشوكي. هذا هو نتيجة مباشرة لسهولة الوصول إلى كل أنواع الخلايا والقدرة على التمييز بصريا كاب القطعة ذات محرك واحد الخلايا العصبية على أساس الشكل والمكان. هذا الفيديو يوضح الطرق المجهرية المستخدمة لتحديد سقف السيارات بين الخلايا العصبية والخلايا العضلية المستهدفة فضلا عن منهجيات للتسجيل من كل نوع من الخلايا. وأكد التعرف على نوع الخلايا العصبية الحركية ، عن طريق ملء كاب صبغ أو بواسطة ميزات مثل الموجي البيوفيزيائية عمل محتمل وخلية المقاومة الإدخال. الخلايا العصبية الحركية ، تسجيلات مشاركة بشكل روتيني لمدة ساعة واحدة تسمح على المدى الطويل من تسجيلات مختلفة متعددة الخلايا العضلية المستهدفة. السيطرة على نمط إطلاق الخلايا العصبية الحركية ، يمكن الاعتماد على قياسات التردد انتقال متشابك عند تقاطع العصبية والعضلية. نظرا لكمي بحجم كبير وانخفاض مستوى الضجيج التي تقدمها كل خلية المشبك الجهد ، يمكن حل كل الأحداث وحدوية في العضلات. هذه الميزة تسمح دراسة خصائص متشابك الأساسية مثل خصائص الإصدار ، وإعادة تدوير الحويصلة ، وكذلك الاكتئاب متشابك والتيسير. درس المزايا التي يوفرها هذا الكسوف في السابق فيفو إعداد أنظمة النموذج العصبي العضلي حيث يتم تحفيز الخلايا العصبية الحركية في العادة ، من قبل أقطاب خارج الخلية والعضلات تكون كبيرة جدا بالنسبة لكامل الخلية المشبك التصحيح. إعداد الزرد غير قابلة للجمع بين التحليل الكهربية مع طائفة واسعة من الأساليب بما في ذلك خطوط المعدلة وراثيا ، ضربة قاضية morpholino ، والتدخل الدوائي في الجسم الحي والتصوير. هذه المناهج ، إلى جانب عدد متزايد من الأمراض العصبية والعضلية النماذج التي تقدمها الخطوط متحولة من الزرد ، وفتح الباب لفهم جديد للاضطرابات العصبية والعضلية البشرية.
لقد تم استخدام التسجيلات الزرد الاقتران (ون وبريم ، 2005) أساسا لدراسة عمليات الإفراج وإعادة تدوير حويصلة خلال التحفيز الترددات العالية. وتعطلت هذه العملية في المسوخ حركية فيها انتقال متشابك العادية للخطر بسبب الطفرات نقطة في متشابك المكونات الرئيسية. على سبيل المثال ، والطفرات التي تعطل الركام بعد المشبكي مستقبلات (أونو وآخرون ، 2001 ، 2002 ، 2004) والتوليف من قبل المشبكي الارسال (وانغ وآخرون ، 2008) نتيجة للامم المتحدة في منسقة السباحة. تسجيلات إقران تقديم المعلومات التي يمكن تحديد مصدر الخلل الوظيفي ، مما يربط السلوك وعلم الوراثة والفيزيولوجيا. ينبغي أن يكون من الممكن الآن لمزيد من عمليات تشريح الكامنة وراء انتقال متشابك من قبل وسائل التعبير عابر في الخلايا العصبية الحركية باستخدام كاب المروجين الحكيم. بهذه الطريقة يمكن أن تكون مهيمنة أو تحور جينات سلبية وأعرب تحديدا في هذه الخلايا العصبية وتحديد كل من العواقب السلوكية والكهربية. ميزة إضافية توفرها لتكوين خلية كاملة لغسيل الكلى يسمح سوما كاب مع العوامل التي يمكن أن يغير يحتمل حويصلة إعادة التدوير ، مثل السموم والمطثية مخازن الكالسيوم. نظرا لبعد المسافة القصيرة بين سوما والعضلات ، وتحدث كذلك ينبغي نشرها ضمن الإطار الزمني للتسجيلات. بدأت المحتملة لهذا الإعداد فقط لاستغلالها. شفافية من الأسماك في هذا الموقع العمر وسطحي من نقاط الاشتباك العصبي كما يسهل استخدام الأدوات البصرية (Fetcho وأومالي ، 1997 ؛ Fetcho وHigashijima ، 2004). كنا ناجحة جدا في قياس إندو وإيماس في الأسماك الحية باستخدام الأصباغ وزير الخارجية والمؤشرات الجينية مثل Synaptophluorin (لي وآخرون ، 2003). بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام الفلورسنت السموم مترافق لتسمية البروتينات متشابك للتصوير الأسماك الحية (ايبانيز – Tallon وآخرون ، 2004). نظرا لبساطة هذا المستحضر أنه يحمل وعدا كبيرا للدراسة في المستقبل.
The authors have nothing to disclose.
بتمويل من المعاهد الوطنية للصحة (NS – 18205).
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Pneumatic transducer tester | Fluke Biomedical Instruments | DPM1B | ||
0.002 x 3 inch tungsten rod | A-M Systems Inc | 715000 | ||
Sylgard 184 Elastomer | Dow Corning Corp. | The thickness of application will affect the DIC optics |