진동 프로브와 함께 생체 전류의 측정
Summary
다양한 생물 학적 시스템에 생체 전류를 측정하는 비침습 진동 프로브의 제조, 교정 및 사용 설명합니다.
Abstract
이온의 적극적인 교통 수단에 의해 생성된 전기 분야는, 많은 생물 학적 시스템에 존재하고 종종 조직과 장기에 중요한 기능을 제공하고 있습니다. 예를 들면, 그들은 상처 치료하는 동안 셀 마이 그 레이션을 감독하는 데 중요한 역할을한다. 여기 세포외 전기 전류를 측정 ultrasensitive 진동 프로브의 제조 및 사용에 대해 설명합니다. 탐사선은 생리 식염수에 μA / cm 2 범위에서 이온 전류를 감지할 수있는 작은 플래티넘 – 블랙 팁 (30-35 μm의)와 절연, 날카롭게 금속 와이어입니다. 프로브는 압전 벤더에 의해 약 200 Hz에서에서 진동이다. 이온 전류의 존재에서, 프로브는 운동의 극단 사이의 전압 차이를 감지합니다. 잠금 기능을 진동의 프로브의 주파수에 잠금하여 외부 노이즈 앰프 아웃 필터. 데이터는 컴퓨터에 기록됩니다. 프로브가 정확히 1.5 μA / cm 2의 전류를 적용 챔버를 사용하여 적절한 생리 실험의 시작과 끝에 보정합니다. 우리는 프로브를 만들어 시스템을 설정하고 조정하는 방법에 대해 설명합니다. 우리는 또한 각막 측정의 기술을 설명하고, 다른 표본 (각막, 피부, 뇌)에서 몇 가지 대표적인 결과를 보여줍니다.
Protocol
1. 프로브 제조 빈 프로브는 (아래에있는 '특정 시약 및 장비의 표'참조) (elgiloy / 스테인레스 parylene – 코팅 microelectrodes) 세계 정밀 계측기에서 구입한 있습니다. 프로브 팁 뒤에 25-30mm 잘라 컷 끝에 parylene 절연 약 5mm 좋은 연결을 보장하기 위해 메스 (# 11 블레이드)와 함께 거리에 스크랩한 것입니다. 프로브 전기 – 전도성 실버로드 에폭시 (예 : 라이트 – 록 SL65) [* 아래 참고…
Discussion
우리는 저렴한 비용으로, 기초하지만, 생물 학적 시스템의 다양한 비 invasively 전류를 측정하는 매우 민감한 진동 프로브 시스템을 설명합니다.
가능한 수정
- 백금 / 이리듐 전극 (세계 정밀 계측기, 고양이 # PTM23B20)이 경우에는 대신 스테인리스 스틸을 사용 후, 골드 도금 무대 제거하실 수 있습니다.
애플 리케이션
우리의 ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 교수 리차드 Borgens, 진동 프로브 시스템을 조립에 대한 도움을 마비 연구, 퍼듀 대학을위한 센터에 감사하고 있습니다. 본 연구는 MZ와 BR에 네이 부여 NIH 1R01EY019101 지원하고, 재생 의료 RB1 – 01417의 캘리포니아 공과 대학, NSF MCB – 0951199에서 보조금으로하고 실명, UC 데이비스 안과를 방지하기 위해 연구에서 무제한 부여하여 일부 인치되었습니다
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Eligoy-Stainless Electrode | World Precision Instruments | SSM33A70 | 76 mm, 7 MΩ, 1-2μm tip | |
| Gold R30 connector | www.vectorelect.com | R30 | Re-usable | |
| Silver-loaded epoxy | 3M | SL65 | Mix 1-part Resin with 1-part Hardener | |
| Dissecting microscope | Olympus | SZ40 | Magnification x6 to x40 | |
| Potassium dicyanoaurate (KAu(CN)2) | Sigma-Aldrich | 379867 | CAUTION: Toxic | |
| Chloroplatinic acid hydrate (H2PtCl6 x 6H2O) | Sigma-Aldrich | 520896 | CAUTION: Toxic | |
| Lead(II) acetate trihydrate (Pb(CH3CO2)2 x 3H2O) | Sigma-Aldrich | 185191 | CAUTION: Toxic | |
| Nano-Amp power source | Made in-house | – | Powered by six 1.5 V (AAA) batteries | |
| 3-dimensional micro-positioner | Line Tool Co. | Model H | ||
| Lock-in amplifier | Stanford Research Systems | SR530 | ||
| Digital I/O interface | National instruments | PCI-6220 | ||
| Shielded Connector Block with BNC connections | National instruments | BNC-2110 | ||
| Strathclyde Electrophysiology Software | University of Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, UK | WinWCP V4.1.5 | Free download from: http://spider.science.strath.ac.uk/sipbs/software_ses.htm | |
| Calibration Chamber | Made in-house | |||
| Constant Current Calibrator | Vibrating Probe Company | Powered by one 9 V (PP3) battery |
Referências
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Citar este artigo
Reid, B., Zhao, M. Measurement of Bioelectric Current with a Vibrating Probe. J. Vis. Exp. (47), e2358, doi:10.3791/2358 (2011).