في الرحم وحقن داخل البطيني Electroporation الجنين الجرذ E16

Abstract

داخل الرحم في الجسم الحي ، وحقن electroporation من القشرة المخية الحديثة الفئران الجنينية يوفر أداة قوية للتلاعب من أسلاف الفردية التي تبطن جدران البطين الجانبي. الآن هذه التقنية المستخدمة على نطاق واسع لدراسة العمليات التي ينطوي عليها corticogenesis بالإعراب عن الإفراط أو هدمت الجينات ومراقبة الآثار المترتبة على انتشار الخليوي ، والهجرة ، والتمايز. في مقارنة لاستراتيجيات خروج المغلوب التقليدية ، في الرحم ، electroporation يوفر وسيلة سريعة لمعالجة مجموعة من الخلايا خلال نافذة زمنية محددة. في هذا البروتوكول الفيديو ، ونحن الخطوط العريضة لمنهجية تجريبية لاعداد الفئران للجراحة ، ويعرض من خلال أبواق الرحم laporatomy ، حقن الحمض النووي في البطينات الجانبية للجنين النامي ، electroporating أسلاف الحمض النووي في بطانة الجدار الجانبي ، ورعاية للحيوانات في مرحلة ما بعد الجراحة. مختبرنا يستخدم هذا البروتوكول لعملية جراحية في E15 – E21 الفئران ، ولكن هو الأكثر شيوعا تنفيذ ذلك في E16 كما هو مبين في هذا الفيديو.