En injection intraventriculaire Utero et l'électroporation d'embryons de rat E16

Abstract

In utero in vivo par injection et l'électroporation du néocortex du rat embryonnaire fournit un outil puissant pour la manipulation des progéniteurs individuelles le long des parois du ventricule latéral. Cette technique est maintenant largement utilisée pour étudier les processus impliqués dans corticogenesis par une sur-exprimant ou faire tomber les gènes et l'observation des effets sur la prolifération cellulaire, la migration et la différenciation. En comparaison avec les stratégies KO traditionnelle, in utero électroporation fournit un moyen rapide de manipuler une population de cellules pendant une fenêtre temporelle spécifique. Dans ce protocole vidéo, nous exposons la méthodologie expérimentale pour la préparation de rats pour la chirurgie, ce qui expose les cornes utérines travers laporatomy, l'injection d'ADN dans les ventricules latéraux de l'embryon en développement, électroporation d'ADN dans le progéniteurs tapissant la paroi latérale, et le soin des animaux d'après- chirurgie. Notre laboratoire utilise ce protocole pour les chirurgies sur des rats E15-E21, cependant il est plus couramment réalisée à E16 comme le montre cette vidéo.