In Utero инъекций Внутрижелудочковая и электропорации E16 крысиных эмбрионов

Abstract

В внутриутробно в естественных условиях инъекции и электропорации эмбриональных неокортекса крысы предоставляет мощный инструмент для манипулирования отдельными прародителей подкладка стены бокового желудочка. Эта техника в настоящее время широко используется для изучения процессов, связанных с corticogenesis более экспрессией или сбить гены и наблюдая воздействие на клеточную пролиферацию, миграцию и дифференцировку. По сравнению с традиционной стратегии нокаутом, внутриутробно электропорации обеспечивает быстрое средство для манипулирования популяцию клеток в течение определенного временное окно. В этом видео-протокол, мы наметим экспериментальной методологии для подготовки к операции крыс, выставляя рога матки через laporatomy, потребители инъекционных ДНК в боковых желудочков развивающегося эмбриона, electroporating ДНК в прародителями подкладка боковой стенке, и ухаживать за скотом пост- хирургии. Наша лаборатория использует этот протокол для операций на E15-E21 крыс, однако это наиболее часто выполняемая на E16, как показано в этом видео.