Nous avons développé un modèle de patte postérieure alternant le déchargement chez la souris. Le principal avantage de notre membre postérieur déchargement queue anneau de méthode au cours de la traditionnelle Morey-Holton queue de traction technique est une procédure simple et directe qui minimise le stress sur l'animal.
Le Morey-Holton hindlimb déchargement (HU) est une méthode largement acceptée National Aeronautics and Space Administration (NASA) basé au sol modèle pour étudier désuétude-atrophie chez les rongeurs 4-6. Notre étude a évalué une méthode alternant à l'étalon-or de Morey-Holton HU queue de traction technique chez la souris. Cinquante-quatre souris femelles (4-8 mo.) Ont été HU pendant 14 jours (n = 34) ou 28 jours (n = 20). Récupération de Hu a été évaluée après 3 jours de marche en cage normal après HU (n = 22). Âgés de souris apparié (n = 76) a servi de port de poids contrôles.
Avant HU un anneau de queue a été formée avec un fil d'acier 2-0 chirurgical stérile qui a été adoptée par la 5 ème, 6 ème, 7 ème ou de l'espace disque intervertébral et façonné dans un anneau à partir de laquelle les souris ont été suspendues. Lieu vertébrale pour la queue-anneau a été sélectionné pour un juste équilibre entre le poids corporel des animaux, sans interférer avec la défécation.
Nous avons déterminé le succès de cette nouvelle technique HU en évaluant le poids corporel avant et après HU, degré d'atrophie du soléaire, et HU masse surrénalienne suivantes. Le poids corporel des souris avant HU (24,3 ± 2,9 g) n'a pas significativement baisser immédiatement après 14j de HU (22,7 ± 1,9 g), 28d de HU (21,3 + 2,1 g), ou après trois jours de récupération (24,0 ± 1,8 g) . La masse du muscle soléaire significativement diminué (-39,1%, -46,6% et) après HU pendant 14 jours et 28 jours respectivement (p <0,001). Après trois jours de la reprise de masse soléaire significativement augmenté à 74% des valeurs de contrôle. Poids des glandes surrénales de souris HU ne sont pas différents par rapport aux souris témoins.
Le succès de notre méthode HU roman est attestée par le maintien du poids corporel des animaux, comparables poids des glandes surrénales, et l'atrophie soléaire suivantes HU, correspondant aux valeurs littérature attendus 2, 7, 8. Les principaux avantages de cette méthode HU comprennent: 1) la facilité d'un examen lors de la queue de suspension; 2) une probabilité moindre de queue cyanosée, enflammée, et / ou nécrotiques fréquemment observés avec la queue de la copie privée et HU; 3) pas de possibilité de mâcher des souris de la traction bande et sortir de l'appareil de suspension et 4) une récupération rapide et de l'activité normale en cage immédiatement après HU.
Nous avons évalué une méthode alternative de souris hindlimb déchargement, dont nous avons déterminé à être un grand succès. La méthode la queue-anneau tel que décrit ici a été utilisé pour la suspension des membres postérieurs à long terme, et d'étudier HU récupération après. Sous chacune de ces conditions, il n'y avait aucune preuve d'incapacité à s'adapter comme en témoigne la prise alimentaire stable, le poids corporel et du poids des surrénales de la souris. Cette technique queue anneau HU est facile à réaliser et peut être facilement intégrée à la pratique chirurgicale très peu.
Il ya plusieurs avantages de la queue-anneau méthode par rapport à la traditionnelle Morey-Holton 5, 6 méthode. Tout d'abord, la peau et du site d'implantation anneau sur la queue qui sont toujours visibles, donc si des problèmes surviennent, il est évident immédiatement, non pas seulement à la fin de la période de suspension. Deuxièmement, les animaux ne sont pas en mesure de sortir de l'appareil de suspension à tout moment pendant HU, évitant la nécessité de rendre une décision de savoir s'il faut garder une souris ou pas dans l'ensemble des données. Par ailleurs, les souris ne se soucient pas de l'appareil ring et quand ils sont libérés de HU pour la reprise, ils n'ont pas altérer leur queue, permettant une phase de reprise transparente après HU. Enfin, des membres postérieurs des souris déchargé avec la méthode tail-anneau de maintenir leur poids corporel supérieure des membres postérieurs des souris déchargé par le Morey-Holton queue de traction technique. Dans nos mains après 14 jours d'HU, nous avons observé une légère perte (-6,8%) mais non significative de la masse corporelle. Alors Ingalls et al. Ont observé une diminution significative de -12% en poids corporel chez la souris après 14 jours d'HU par la méthode de Morey-Holton 3. Bien Ingalls n'ont pas fait état du poids des surrénales, il semble que notre queue anneau procédé confère moins de stress sur la souris (poids des surrénales chez nos souris HU ne sont pas différents que les contrôles) et un meilleur entretien du poids du corps pendant toute la période hindlimb déchargement.
En résumé, une méthode de l'anneau queue de membre postérieur déchargement a été développé et testé sur des souris HU pour les 14 et 28 jours, et sur des souris retourné à la récupération cage pour 3 jours après HU. Sur la base du poids des surrénales, la masse corporelle et la prise alimentaire, les souris semblent bien adaptés à l'appareil d'arrière-ring. Les membres postérieurs queue bague de déchargement méthode est utile, simple alternative à la technique traditionnelle de Morey-Holton hindlimb déchargement.
The authors have nothing to disclose.
Les auteurs tiennent à remercier Andrew J Dunn, un étudiant de premier cycle de recherche exceptionnels dans notre laboratoire, pour son aide technique et les soins aux animaux. L'Institut National de la Santé et des subventions HD058834 l'Université du Missouri Sciences Life Fellowship financé ce travail.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Wire cutters/pliers | Ace Hardware | 84-056 | ||
Gauze | Fisher Scientific | 22-037-901 | ||
Heating pad | Sunbeam | Z-1228-001 | ||
Silver nitrate applicators | ARZOL | 0001-2 | ||
Isoflurane,USP | Novaplus | NDC 0409-3292-49 | ||
Chlorhexidine Gluconate 4% | Purdue Products L.P | NDC 67618-200-01 | ||
Sterile 2-0 surgical steel suture | Ethicon | SS-28 | ||
25 X 5/8 A gauge needle | Terumo | NN 2516R | ||
Hemostat/ needle holder | Fine Science Tools | 12500-12 | ||
Size 10-24 X 4 machine screws | Hillman The Fastener Center | 90272 | ||
Nylon lock nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180141 | ||
Wing nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180243 | ||
Fender Washer size ¼ X 1 | Hillman The Fastener Center | 290012 | ||
Fishing swivel with snap hook size #6, 1-11/16” | Bass Pro Shop | 38-481-554-01 | ||
Metal sewing machine bobbin. | Singer | 45785 | ||
Paper clip | Office Depot | 221720 | ||
2” black paper binder clamps. | Office Depot | 308957 | ||
Scotch Multi-Use Duct Tape | Office Depot | 790710 | ||
1-3/8” Plated slotted steel bar | Home Depot | 548932 | Extends slightly beyond the full length of the cage | |
50cm X 40cm X 20cm cage (rat cage | Alternative Design Manufacturing | RC88D-PC | ||
Water Bottle | Alternative Design Manufacturing | WB16FS | ||
Stainless Steel wire | Small Parts, Inc | SWX-4029 | U-shaped wire to support water bottle |