Vi utvecklade en alternant bakdelen lossning modell i möss. Den främsta fördelen med våra bakdelen lossning svans-ringen metoden jämfört med konventionell Morey-Holton tail-grepp tekniken är en enkel okomplicerad procedur som minimerar stressen på djuret.
Den Morey-Holton bakdelen lossning (HU) är en allmänt accepterad National Aeronautics and Space Administration (NASA) markbaserade modell för att studera ur bruk-atrofi hos gnagare 4-6. Vår studie utvärderade ett alternant metod till guldmyntfot Morey-Holton HU tail-grepp teknik i möss. Femtiofyra honmöss (4-8 mån.) Var HU under 14 dagar (n = 34) eller 28 dagar (n = 20). Återhämtning från HU bedömdes efter 3 dagar av normal bur förflyttningar efter HU (n = 22). Åldrad matchas möss (n = 76) fungerade som viktbärande kontroller.
Innan HU en svans ring bildades med en 2-0 sterila kirurgiska stål som passerat 5: e, 6: e eller 7: e inter-vertebrala diskutrymme och formas till en ring från vilken mus avbröts. Vertebrala plats för svansen-ringen valdes på lämpligt balansera djurens kroppsvikt utan att störa avföring.
Vi bestämde framgången för denna roman HU teknik genom att bedöma kroppsvikt före och efter HU, grad av soleus atrofi, och adrenal massa efter HU. Kroppsvikt för möss före HU (24,3 ± 2.9g) hade ingen signifikant nedgång direkt efter 14d i HU (22,7 ± 1.9g), 28d i HU (21,3 + 2.1g) eller efter 3 dagar återhämtning (24,0 ± 1,8 g) . Soleus muskelmassa minskade kraftigt (-39,1% och -46,6%) efter HU i 14 dagar och 28 dagar (p <0,001). Efter tre dagars återhämtning soleus massa ökade kraftigt till 74% av kontroll värderingar. Binjurarnas vikt av HU möss var inte annorlunda jämfört med kontroll möss.
Framgången för våra nya HU-metoden framgår av underhåll av djurens kroppsvikt, motsvarande binjurarnas vikt körtel och soleus atrofi efter HU, motsvarande förväntade litteratur värden 2, 7, 8. Den främsta fördelen med denna HU metod är bland annat: 1) enkel svans undersökning under upphängning, 2) minskade sannolikheten för cyanotiska, inflammerad, och / eller nekrotisk svansar frekvent med svans-tejpning och HU, 3) ingen möjlighet att möss tugga dragkraft tejp och kommer ut av fjädring apparater, och 4) en snabb återhämtning och normal bur aktivitet direkt efter HU.
Vi utvärderade ett alternativ metod i bakdelen lossning möss, som vi fast beslutna att vara mycket framgångsrik. Svansen-ringen metod som beskrivs här har använts för långsiktig bakdelen fjädring, och att studera återhämtning efter HU. Under varje av dessa villkor fanns det inga tecken på misslyckande att anpassa sig, vilket framgår av stabila födointag, kroppsvikt, och binjurarnas vikt i möss. Denna svans-ringen HU tekniken är enkel att utföra och kan lätt integreras med mycket lite kirurgiska praktiken.
Det finns flera fördelar med svans-ringen metod jämfört med de traditionella Morey-Holton 5, 6 metod. Först huden och ring implanteringsstället på att svansen är alltid synliga, så om det uppstår problem det är uppenbart omedelbart, inte bara i slutet av den perioden. Andra djur inte kan få ut av suspensionen apparaten när som helst under HU, undanröja behovet av att fatta ett beslut om att hålla en mus eller inte i datamängden. Dessutom bryr mössen inte ringen apparater och när de frigörs från HU för återvinning de inte mixtra med sina svansar, vilket möjliggör en sömlös återhämtningsfas efter HU. Slutligen bakbenen lossas möss med svansen-ringen metoden bibehålla sin kroppsvikt bättre än möss bakbenen lossas från Morey-Holton tail-grepp teknik. I våra händer efter 14 dagar av HU vi observerade en liten (-6,8%) men icke-signifikant förlust i kroppen-massa. I Ingalls et al. Observerade en signifikant -12% minskning av kroppsvikten hos möss efter 14 dagar av HU av Morey-Holton metod 3. Även Ingalls inte rapporterade binjurarnas vikt verkar det som om vår svansen-ringen metoden ger mindre stress på musen (binjurarnas vikt i vår HU möss är inte annorlunda än kontroller) och bättre underhåll av kroppsvikten under hela bakdelen lossning period.
Sammanfattningsvis var en svans ringmetoden i bakdelen lossning utvecklad och testad på möss HU i 14 och 28 dagar, och på möss tillbaka till buren återhämtning för 3 dagar efter HU. På grundval av binjurarnas vikt, body mass-och födointag, möss verkar ha anpassat sig väl till svans-ringen apparater. Svansen-ringen bakdelen lossning metoden är ett användbart, enkelt alternativ till den traditionella Morey-Holton bakdelen lossning teknik.
The authors have nothing to disclose.
Författarna vill tacka Andrew J Dunn, en enastående grundutbildningen doktorand i vårt laboratorium, för hans tekniska stöd och omsorg om djuren. National Institute of Health bidrag HD058834 och University of Missouri Life Sciences stipendier finansierade detta arbete.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Wire cutters/pliers | Ace Hardware | 84-056 | ||
Gauze | Fisher Scientific | 22-037-901 | ||
Heating pad | Sunbeam | Z-1228-001 | ||
Silver nitrate applicators | ARZOL | 0001-2 | ||
Isoflurane,USP | Novaplus | NDC 0409-3292-49 | ||
Chlorhexidine Gluconate 4% | Purdue Products L.P | NDC 67618-200-01 | ||
Sterile 2-0 surgical steel suture | Ethicon | SS-28 | ||
25 X 5/8 A gauge needle | Terumo | NN 2516R | ||
Hemostat/ needle holder | Fine Science Tools | 12500-12 | ||
Size 10-24 X 4 machine screws | Hillman The Fastener Center | 90272 | ||
Nylon lock nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180141 | ||
Wing nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180243 | ||
Fender Washer size ¼ X 1 | Hillman The Fastener Center | 290012 | ||
Fishing swivel with snap hook size #6, 1-11/16” | Bass Pro Shop | 38-481-554-01 | ||
Metal sewing machine bobbin. | Singer | 45785 | ||
Paper clip | Office Depot | 221720 | ||
2” black paper binder clamps. | Office Depot | 308957 | ||
Scotch Multi-Use Duct Tape | Office Depot | 790710 | ||
1-3/8” Plated slotted steel bar | Home Depot | 548932 | Extends slightly beyond the full length of the cage | |
50cm X 40cm X 20cm cage (rat cage | Alternative Design Manufacturing | RC88D-PC | ||
Water Bottle | Alternative Design Manufacturing | WB16FS | ||
Stainless Steel wire | Small Parts, Inc | SWX-4029 | U-shaped wire to support water bottle |