और वयस्क मानव त्वचा से उपकला स्टेम सेल के अलगाव संस्कृति
Summary
एक तेजी से, मानव त्वचा से व्यवहार्य वयस्क उपकला स्टेम कोशिकाओं को अलग की मजबूत तरीका में वर्णित है. विधि त्वचा मैट्रिक्स कोलेजन के enzymatic पाचन, बाल follicles और एकल कक्ष सेल संस्कृति के लिए निलंबन या ऊतक के टुकड़े के अलगाव की तोड़ के बाद का इस्तेमाल.
Abstract
सभी स्वयं renewing के ऊतकों के homeostasis वयस्क स्टेम सेल पर निर्भर है. के रूप में undifferentiated स्टेम कोशिकाओं असममित प्रभागों से गुजरना है, वे बेटी कोशिकाओं है कि स्टेम सेल phenotype और पारगमन amplifying (टीए कोशिकाओं) कोशिकाओं है कि स्टेम सेल आला से विस्थापित हो, तेजी से प्रसार से गुजरना और टर्मिनली ऊतक जनसंख्या फिर से बढ़ा अंतर बनाए रखने के उत्पन्न करते हैं.
उपकला स्टेम कोशिकाओं इन विट्रो proliferative संभावित में एक उच्च और के रूप में साइकिल चालन के धीमी गति से 1-3 vivo में कोशिकाओं लेबल बनाए रखने के साथ कोशिकाओं के रूप में किया गया है epidermis, बाल कूप, और आंत में पहचान की है. वयस्क, ऊतक विशेष स्टेम कोशिकाओं ऊतकों जिसमें वे सामान्य शारीरिक कारोबार के दौरान 4-5 तनाव के समय के दौरान के रूप में अच्छी तरह के रूप में रहते के उत्थान के लिए जिम्मेदार हैं . इसके अलावा, स्टेम सेल आमतौर पर बहु – शक्तिशाली माना जाता है, 6 ऊतक के भीतर अनेक प्रकार की कोशिकाओं को जन्म दे की क्षमता रखने. उदाहरण के लिए, कृंतक बाल कूप स्टेम कोशिकाओं epidermis, वसामय ग्रंथियों, और बाल रोम 7-9 उत्पन्न कर सकते हैं. हम पता चला है कि मानव बाल कूप उभाड़ना क्षेत्र से स्टेम कोशिकाओं एक्ज़िबिट 10 बहु – संभावनाओं.
स्टेम सेल जैव चिकित्सा अनुसंधान में एक महत्वपूर्ण उपकरण, विकासात्मक जीव विज्ञान, भेदभाव, tumorigenesis और उनके संभव चिकित्सीय उपयोगिता के लिए के अध्ययन के लिए इन विट्रो प्रणाली में एक के रूप में उनकी उपयोगिता के कारण बन गए हैं. यह संभावना है कि वयस्क उपकला स्टेम कोशिकाओं बहिर्जनस्तरीय dysplasias, monilethrix, Netherton सिंड्रोम, Menkes रोग, वंशानुगत बाह्यत्वचालयन bullosa और 11-13 alopecias जैसे रोगों के इलाज में उपयोगी हो जाएगा. इसके अतिरिक्त, जला घाव, पुराने घावों और अल्सर जैसे अन्य त्वचा की समस्याओं को स्टेम सेल से संबंधित 14,15 उपचारों से लाभ होगा . एक pluripotent (आईपीएस कोशिकाओं) राज्य 16,17 में वयस्क कोशिकाओं के reprogramming के लिए क्षमता को देखते हुए, मानव त्वचा में आसानी से सुलभ है और विस्तार योग्य वयस्क स्टेम सेल रोग के एक विस्तृत श्रृंखला के लिए प्रेरण और बहाव थेरेपी के लिए कोशिकाओं का एक महत्वपूर्ण स्रोत प्रदान कर सकता है मधुमेह और पार्किंसंस रोग.
Protocol
Discussion
सेल निष्कर्षण और संस्कृति वर्णित विधियों आश्चर्यजनक सतही और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हैं. हम व्यक्तियों की एक व्यापक आयु सीमा के पार विरासत में मिला त्वचा 18 दोष के साथ रोगियों सहित दर्जनों स…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम के NIH / NCI R01CA 118,916 अनुदान द्वारा वित्त पोषित है
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | GIBCO | 11995 | ||
| Hams F12 | GIBCO | 11765 | ||
| Fetal Bovine Serum (FBS) | GIBCO | 16000 | ||
| Insulin | GIBCO | 12585 | ||
| T3 | Sigma | T-2752 | ||
| Transferrin | Roche | 10652202001 | ||
| Hydrocortisone | Sigma | H-4001 | ||
| Cholera Toxin | Sigma | C8052 | ||
| Epidermal growth factor (EGF) | Sigma | E-9644 | ||
| Adenine | Sigma | A9795 | ||
| Trypsin(10X) | GIBCO | 15090 | ||
| VERSENE | GIBCO | 15040 | ||
| G418 Sulfate | Cellgro | 30-234-CR | ||
| Hanks’ Balanced Salt solution | Sigma | H6648 | ||
| 1X PBS | Cellgro | 21-040-CV | ||
| Mitomycin C | Roche | 10107409001 | ||
| Penicillin/streptomycin | Invitrogen | 15140122 | ||
| Dispase | Invitrogen | 17105 | ||
| Crystal Violet | Fisher | C581-25 |
Keratinocyte media (KCM)
[DMEM and Ham s F12 (GIBCO, 3:1), adenine (Sigma, 180 mM), 10% fetal bovine serum (GIBCO), cholera toxin (ICN, 0.1 nM), penicillin/streptomycin (GIBCO, 100 U/ml and 100 mg/ml, respectively), hydrocortisone (Sigma, 0.4 mg/ml, 1.1 mM), T/T3 (transferrin, GIBCO, 5 μg/ml, 649 nM; and triiodo-l-thyronine, Sigma, 2 nM), insulin (Sigma, 5 mg/ml, 862 nM), and EGF (Sigma, 10 ng/ml, 1.6 nM), pH 7.2]
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