الاصبع العصا منهجية أخذ عينات من الدم لتحديد بممارسة المستحثة الأبوطوزيس اللمفاويات
Summary
ممارسة قادر على إحداث موت الخلايا المبرمج في الخلايا المناعية. هناك حدود القياس المختلفة ، لا سيما فيما يتصل مقدار الوقت اللازم لعزل ومعالجة عينة من الدم قبل التقييم. تظاهر هو إجراء سريع ومينيملي لتحليل ممارسة النشاط الخلايا اللمفاوية.
Abstract
هو ممارسة التحفيز الفسيولوجية قادرة على إحداث موت الخلايا المبرمج في الخلايا المناعية. حتى الآن ، وقد تم تحديد أوجه القصور المختلفة مع قياس هذه الظاهرة ، لا سيما فيما يتصل مقدار الوقت اللازم لعزل ومعالجة عينة من الدم قبل تقييم موت الخلايا. وبسبب هذا ، فمن الصعب تحديد ما إذا كان يمكن ساهمت الزيادات التي أعلن عنها في موت الخلايا المبرمج للخلايا المناعية الأثر الفعلي لممارسة على النظام ، أو هي انعكاس للوقت وتجهيزها في نهاية المطاف من الضروري الحصول على هذا القياس. في هذه المقالة أن نبرهن إجراء سريع ومينيملي لتحليل ممارسة النشاط الخلايا اللمفاوية. خلافا لغيرها من التقنيات ، إضافة إلى الدم الكامل وحة الضد فور الحصول على العينة. بعد فترة الحضانة ، وlysed خلايا الدم الحمراء ومستعدون عينات لتحليلها. استخدام إجراء المعاينة الاصبع العصا يقلل من حجم الدم المطلوبة ، ويقلل من عدم الراحة لمواضيع.
Protocol
Discussion
وأظهر جمع العينات مينيملي الداخلي والتحليل اللاحق لتحليل كل من المراحل المبكرة والمتأخرة من ممارسة النشاط الخلايا اللمفاوية. ومن الممكن أيضا أن تستبعد بوضوح تلك الخلايا ، والتي هي نخرية ، وأفكارك لا. هذا الإجراء يتغلب على السلبيات وعدم الراحة المرتبطة بزل الوريد ال…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا البحث من قبل منحة كلية جديدة من مجلس المنح الدراسية في كلية جامعة كنتاكي الغربية.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Flow Cytometry Binding Buffer | eBioscience | 00-4222-26 | ||
| RBC Lysis Buffer | eBioscience | 00-4333-57 | ||
| Lancet Device | Accu Check Soft Touch | Roche Diagnostics Corp. | ||
| Capillary tubes | Heparinized Capillary Tubes | Chase Scientific Glass, Inc. | 501 | |
| Centrifuge | GmC Lab | Gilson | PMS-880 | |
| Annexin V-FITC Conjugated | Biovision Inc. | K201-400-1 | ||
| CD4-PE Conjugated | Anti-human, clone RPA-T4 | eBioscience | 12-0049-42 | |
| CD8-PE Conjugated | Anti-human, clone OKT8 | eBioscience | 12-0086-73 | |
| CD19-PE Conjugated | Anti-human, clone HIB19 | eBioscience | 12-0199-42 | |
| 7-AAD Viability Staining Solution | eBioscience | 00-6993-50 | ||
| CD45RA-APC Conjugated | Anti-human, clone HI100 | eBioscience | 17-0458-42 | |
| Flow cytometer | C6 | Accuri |
Referências
- Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans. Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).
- Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K. Prolonged exercise, lymphocyte apoptosis and F2-isoprostanes. Eur. J. Appl. Physiol. 87, 38-42 (2002).
- Mooren, F. C., Bloming, D., Lechtermann, A., Lerch, M. M., Völker, K. Lymphocyte apoptosis after exhaustive and moderate exercise. J. Appl. Physiol. 93, 147-153 (2002).
- Peters, E. M., Eden, M. V. a. n., Tyler, N., Ramautar, A., Chutergoon, A. A. Prolonged exercise does not cause lymphocyte DNA damage or increased apoptosis in well-trained endurance athletes. Eur. J. Appl. Physiol. 98, 124-131 (2006).
- Wang, J. -. S., Huang, Y. -. H. Effects of exercise intensity on lymphocyte apoptosis induced by oxidative stress in men. Eur. J. Appl. Physiol. 95, 290-291 (2005).
- Mooren, F. C., Lechtermann, A., Völker, K. Exercise-induced apoptosis of lymphocytes depends on training status. Med. Sci. Sports Exerc. 36, 1476-1483 (2004).
- Navalta, J. W., Sedlock, D. A., Park, K. -. S. Blood treatment influences the yield of apoptotic lymphocytes after maximal exercise. Med. Sci. Sports Exerc. 37, 369-373 (2005).
