Finger-stick Blood Sampling Methode voor de bepaling van lichamelijke oefening geïnduceerde apoptose Lymfocyt
Summary
De uitoefening in staat is om apoptose in immuuncellen. Er zijn verschillende meet-beperkingen, met name met betrekking tot de hoeveelheid tijd die nodig is om te isoleren en te behandelen een bloedmonster voorafgaand aan de beoordeling. Aangetoond is een snelle en minimaal invasieve procedure voor de analyse van de oefening geïnduceerde apoptose lymfocyten.
Abstract
De oefening is een fysiologische stimulus in staat is het induceren van apoptose in immuuncellen. Tot op heden zijn er diverse beperkingen geïdentificeerd met het meten van dit fenomeen, met name met betrekking tot de hoeveelheid tijd die nodig is om te isoleren en te behandelen een bloedmonster voorafgaand aan de beoordeling van celdood. Vanwege dit, is het moeilijk om vast te stellen of melding van een toename in de immuun cel apoptose kan worden bijgedragen aan het werkelijke effect van de oefening op het systeem, of zijn een weerspiegeling van de tijd en de verwerking noodzakelijk is om uiteindelijk te verkrijgen deze meting. In dit artikel zullen we laten zien een snelle en minimaal invasieve procedure voor de analyse van de oefening geïnduceerde apoptose lymfocyten. In tegenstelling tot andere technieken, is volbloed toegevoegd aan een antilichaam panel onmiddellijk na het verkrijgen van een monster. Na de incubatieperiode, worden de rode bloedcellen gelyseerd en monsters zijn klaar om te worden geanalyseerd. Het gebruik van een vinger-stick sampling procedure vermindert de benodigde hoeveelheid bloed, en minimaliseert het ongemak te onderwerpen.
Protocol
Discussion
Een minimaal invasieve monstername procedure en de daarop volgende analyse is aangetoond voor de analyse van zowel de vroege en late fase van de oefening geïnduceerde apoptose lymfocyten. Het is ook mogelijk om duidelijk uit te sluiten die cellen, die zijn necrotische en apoptotische niet. Deze procedure overwint de nadelen en ongemak dat verbonden is met invasieve venapunctie uit de antecubitale regio op verschillende tijdstippen voor, tijdens en onmiddellijk na de inspanning, of vastzetten van een katheter voor de du…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit onderzoek werd ondersteund door een nieuwe faculteit Grant van de faculteit Scholarship Council van Western Kentucky University.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Flow Cytometry Binding Buffer | eBioscience | 00-4222-26 | ||
| RBC Lysis Buffer | eBioscience | 00-4333-57 | ||
| Lancet Device | Accu Check Soft Touch | Roche Diagnostics Corp. | ||
| Capillary tubes | Heparinized Capillary Tubes | Chase Scientific Glass, Inc. | 501 | |
| Centrifuge | GmC Lab | Gilson | PMS-880 | |
| Annexin V-FITC Conjugated | Biovision Inc. | K201-400-1 | ||
| CD4-PE Conjugated | Anti-human, clone RPA-T4 | eBioscience | 12-0049-42 | |
| CD8-PE Conjugated | Anti-human, clone OKT8 | eBioscience | 12-0086-73 | |
| CD19-PE Conjugated | Anti-human, clone HIB19 | eBioscience | 12-0199-42 | |
| 7-AAD Viability Staining Solution | eBioscience | 00-6993-50 | ||
| CD45RA-APC Conjugated | Anti-human, clone HI100 | eBioscience | 17-0458-42 | |
| Flow cytometer | C6 | Accuri |
Referências
- Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans. Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).
- Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K. Prolonged exercise, lymphocyte apoptosis and F2-isoprostanes. Eur. J. Appl. Physiol. 87, 38-42 (2002).
- Mooren, F. C., Bloming, D., Lechtermann, A., Lerch, M. M., Völker, K. Lymphocyte apoptosis after exhaustive and moderate exercise. J. Appl. Physiol. 93, 147-153 (2002).
- Peters, E. M., Eden, M. V. a. n., Tyler, N., Ramautar, A., Chutergoon, A. A. Prolonged exercise does not cause lymphocyte DNA damage or increased apoptosis in well-trained endurance athletes. Eur. J. Appl. Physiol. 98, 124-131 (2006).
- Wang, J. -. S., Huang, Y. -. H. Effects of exercise intensity on lymphocyte apoptosis induced by oxidative stress in men. Eur. J. Appl. Physiol. 95, 290-291 (2005).
- Mooren, F. C., Lechtermann, A., Völker, K. Exercise-induced apoptosis of lymphocytes depends on training status. Med. Sci. Sports Exerc. 36, 1476-1483 (2004).
- Navalta, J. W., Sedlock, D. A., Park, K. -. S. Blood treatment influences the yield of apoptotic lymphocytes after maximal exercise. Med. Sci. Sports Exerc. 37, 369-373 (2005).
