Finger-палки забора крови Методология определения Упражнение вызванных лимфоцитов Апоптоз
Summary
Физические упражнения способны индуцировать апоптоз клеток иммунной системы. Существуют различные ограничения измерения, особенно в отношении количества времени, необходимого для изоляции и лечения крови до проведения оценки. Продемонстрированный является быстрым и минимально инвазивные процедуры для анализа упражнения-индуцированного апоптоза лимфоцитов.
Abstract
Упражнение физиологические стимулы способны вызывать апоптоз клеток иммунной системы. На сегодняшний день различные ограничения были выявлены с измерением этого явления, особенно в отношении количества времени, необходимого для изоляции и лечения крови до оценку гибели клеток. Из-за этого, трудно определить, является ли сообщили об увеличении апоптоза клеток иммунной могут быть внесены в реальный эффект физических упражнений на системы, или являются отражением времени и обработки необходимо получить в конечном итоге это измерение. В этой статье мы демонстрируем быстрое и минимально инвазивные процедуры для анализа вызванная осуществлением лимфоцитов апоптоза. В отличие от других методов, цельной крови добавляют антитела панели сразу же после получения образца. После инкубационного периода, красные кровяные клетки лизируются и образцы готовы для анализа. Использование пальца придерживаться процедуры отбора образцов, уменьшает объем крови необходимо, и свести к минимуму неудобства для предметов.
Protocol
Discussion
Малоинвазивных Пример процедуры сбора и последующего анализа показано, для анализа как ранние и поздние фазы вызванная осуществлением лимфоцитов апоптоза. Кроме того, можно четко исключить те клетки, которые являются некротические, а не апоптоза. Эта процедура позволяет преодолеть н?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Это исследование было поддержано Новый грант факультета с Советом факультета стипендию в Университете Западного Кентукки.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Flow Cytometry Binding Buffer | eBioscience | 00-4222-26 | ||
| RBC Lysis Buffer | eBioscience | 00-4333-57 | ||
| Lancet Device | Accu Check Soft Touch | Roche Diagnostics Corp. | ||
| Capillary tubes | Heparinized Capillary Tubes | Chase Scientific Glass, Inc. | 501 | |
| Centrifuge | GmC Lab | Gilson | PMS-880 | |
| Annexin V-FITC Conjugated | Biovision Inc. | K201-400-1 | ||
| CD4-PE Conjugated | Anti-human, clone RPA-T4 | eBioscience | 12-0049-42 | |
| CD8-PE Conjugated | Anti-human, clone OKT8 | eBioscience | 12-0086-73 | |
| CD19-PE Conjugated | Anti-human, clone HIB19 | eBioscience | 12-0199-42 | |
| 7-AAD Viability Staining Solution | eBioscience | 00-6993-50 | ||
| CD45RA-APC Conjugated | Anti-human, clone HI100 | eBioscience | 17-0458-42 | |
| Flow cytometer | C6 | Accuri |
Referências
- Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans. Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).
- Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K. Prolonged exercise, lymphocyte apoptosis and F2-isoprostanes. Eur. J. Appl. Physiol. 87, 38-42 (2002).
- Mooren, F. C., Bloming, D., Lechtermann, A., Lerch, M. M., Völker, K. Lymphocyte apoptosis after exhaustive and moderate exercise. J. Appl. Physiol. 93, 147-153 (2002).
- Peters, E. M., Eden, M. V. a. n., Tyler, N., Ramautar, A., Chutergoon, A. A. Prolonged exercise does not cause lymphocyte DNA damage or increased apoptosis in well-trained endurance athletes. Eur. J. Appl. Physiol. 98, 124-131 (2006).
- Wang, J. -. S., Huang, Y. -. H. Effects of exercise intensity on lymphocyte apoptosis induced by oxidative stress in men. Eur. J. Appl. Physiol. 95, 290-291 (2005).
- Mooren, F. C., Lechtermann, A., Völker, K. Exercise-induced apoptosis of lymphocytes depends on training status. Med. Sci. Sports Exerc. 36, 1476-1483 (2004).
- Navalta, J. W., Sedlock, D. A., Park, K. -. S. Blood treatment influences the yield of apoptotic lymphocytes after maximal exercise. Med. Sci. Sports Exerc. 37, 369-373 (2005).
