Summary

Dra blod från råttor genom ytlig ven och från hjärtat

Published: August 23, 2007
doi:

Summary

Blod drar är nödvändiga i ett stort antal studier, till exempel för att studera farmakokinetiken profil av en förening. Här visar vi hur man drar blod från råttor med hjälp av två tekniker: blod dra av ytlig ven eller från hjärtat.

Abstract

Ritning blod från gnagare är nödvändigt för ett stort antal både in vitro och in vivo-studier. Webbplatser av blod drar är många i gnagare: retro-orbital sinus, halsvenen, maxillary ven, ytlig ven, hjärta. Varje teknik har sina fördelar och nackdelar, och vissa är inte godkända längre i vissa länder (t ex, retro-orbital drar i Holland). En diskussion om olika tekniker för att dra blod finns 1-3. Här presenterar vi två tekniker för att dra blod från råttor, alla med sina specifika tillämpningar.

Blod dra från ytlig ven, förutsatt att det görs på rätt sätt, framkallar minimala lidande hos djur och inte kräver narkos. Denna teknik möjliggör upprepad drar av små mängder av blod, som behövs för farmakokinetiska studier 4,5, bestämma plasmakemi eller blodvärden 6.

Hjärtat punktering tillåter insamling av stora mängder av blod från ett enskilt djur (upp till 10 ml blod kan dras från en 150 g råtta). Denna teknik är därför mycket värdefullt som en terminal förfarande vid utarbetandet blod från ytlig inte skulle ge ett tillräckligt stort urval. Vi använder hjärt punktering när vi behöver tillräckliga mängder av serum från en viss stam av råttor för att växa T-lymfocyter linjer in vitro 4-9.

Protocol

Dra blod från råttor genom ytlig ven och från hjärtat OBS: Alla förfaranden ska godkännas av din högskolans djurvård och använda kommitté. 1. Blod dra av ytlig ven Detta görs utan bedövning och det behövs två personer, en som hanterar råttan, och en som utför lottningen. Gör en kon av en handduk eller hålla råttan med gnagare handskar, lämnar en bakbenen utsätts för. Shave baksidan av benet med en elektri…

Discussion

Ritning blod från ytlig ven är ett bekvämt sätt att få små mängder av blod utan bedövning. Om upprepad provtagning krävs, kontrollera förordningar för att säkerställa att du inte drar alltför mycket blod från en råtta.

Teckning blod från hjärtat är ett bekvämt sätt att få stora mängder blod men detta är en terminal förfarande. Djuret ska avlivas i slutet av blodet oavgjort.

Dessa tekniker (som alla tekniker på levande djur) bör först göras i närvaro av en veterinär eller en veterinär tekniker …

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Needle 20G 1/2 Tool Becton Dickinson 305176 For puncturing the saphenous vein
Microvette 300 Tool Sarstedt 20.1308.100 To collect blood from the saphenous vein
Electric trimmer Tool Braintree CLP-32130  
Needle 23 G 1 Tool Becton Dickinson 305145 For cardiac puncture
5 ml plastic syringe, slip tip Tool Fisher 14-826-12 For cardiac puncture

Referências

  1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
  2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
  3. Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).
  4. Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).
  5. Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).
  6. Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).
  7. Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -. M., Gola, M., Sabatier, J. -. M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. , 936-944 (2001).
  8. Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport. , 317-320 (2003).
  9. Beeton, C., Chandy, K. G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats. Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).

Play Video

Citar este artigo
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).

View Video