この記事では、マイクロメートルスケールでの接着細胞間の細胞 – 細胞相互作用の動的な制御のための実験的アプローチを説明します。肝細胞と間質細胞との間の細胞間コミュニケーションの操作が示されている。開発プラットフォームは、開発や病因を含む生物学的過程、様々な細胞間相互作用の調査を可能にします。
細胞内微小環境の役割は、開発から悪性形質転換への事実上全ての哺乳動物の組織で細胞の運命と機能を決定する際に重要と認識されている。特に、隣接する間質との相互作用は、生物学的現象の茄多に関与されているが、従来の手法はこのような相互作用の空間的および動的な要素を調べるために能力を制限する。
マイクロメカニカルリコンフィギュラブル文化(RC)で、我々は、動的機械的な再配置を介して細胞間相互作用を制御するための可動部に微細加工シリコン基板を採用しています。以前、この方法は時間依存の相互作用および可溶性シグナル1の限られた範囲を示す、肝細胞および非実質細胞の共培養では細胞間の通信を調査するために適用されています。
ここで、我々は詳細にRCシステムの製造および使用について説明します。我々は、ギャップとの接点構成(細い80μmのギャップにより、または直接密着して分離した細胞集団)との間で作動を含めてピンセットを使用してデバイスの部品の取り扱いを示すことから始めます。次に、我々は細部文化の基質、およびコンフルエント細胞単層を得るために必要なマルチステップの細胞播種のプロセスを準備するプロセスを。ライブ顕微鏡を用いて、我々は、異なる可能性が実験的なコンフィギュレーション間の細胞のリアルタイム操作を示しています。トルエンとピラニア洗浄、ポリスチレンのコーティング、および酸素プラズマ処理:最後に、我々は再利用のためのデバイスの表面を再生するために必要な手順を示しています。
このシステムは動的に細胞レベルで操作することが組織の空間的な組織を可能にするという点でユニークです。そのため、このデバイスは、そのような細胞間シグナリングのダイナミクスなどのトピック、接触を介した対水溶性シグナル伝達、細胞の運命決定、毒物学、および細胞のクロストークをスパニング、小説生物学的実験の数を有効にしている。培養基質は、標準組織培養プラスチックであるため?…
The authors have nothing to disclose.
著者は、このデバイスの設計の過程で有用な議論をサルマンKhetani、ジャレッドアレン、クリスFlaim、とオースティンDerfusに感謝。この作品は、全米科学財団学部初期のキャリア開発プログラム、糖尿病および消化器腎臓病の健康/国立研究所の国立研究所、そしてダビデとルシールパッカード財団によってサポートされていました。 EEHはルースL.キルシュシュタイン国立リサーチサービス賞によってサポートされていました。