توصيف المعزولة ، مهواة ، والرئة ماوس المجهزة Perfused مع تدفق نابض
Summary
بروتوكول التالية توضح عملية عزل والتهوية والرئتين instrumenting الماوس لقياس الأوعية الدموية الرئوية الثابتة أو نابض ضغط التدفق العلاقات من أجل تحديد الآثار المترتبة على تدفق الدم ، وتدفق الهواء ، والتغيرات الهوائية والأوعية الدموية التغييرات على حمولة تلوية البطين الأيمن.
Abstract
المعزولة ، التهوية والمجهزة إعداد الرئة الماوس يسمح بقياس الأوعية الدموية الرئوية مطرد ونابض ضغط التدفق العلاقات مع مستقلة السيطرة على معدل التدفق الشرياني الرئوي ، وتدفق معدل الموجي ، ضغط الهواء وضغط الأذين الأيسر. يحسب المقاومة الوعائية الرئوية على أساس متعدد النقطة ، منحنيات ضغط التدفق المطرد ؛ يحسب مقاومة الأوعية الدموية الرئوية من منحنيات ضغط تدفق نابض الحصول على مجموعة من الترددات. كما يعترف الآن سريريا ، هو قياس المعاوقة متفوقة من حمولة تلوية البطين الأيمن من المقاومة لأنها تضم تأثيرات الامتثال الأوعية الدموية ، والتي لا يكاد يذكر ، وخصوصا في الدورة الدموية الرئوية. ثلاثة قياسات مهمة للمقاومة — صفر هيرتز المعاوقة Z 0 ، خاصية مقاومة Z C ، ومؤشر انعكاس موجة R ث — توفير نظرة ثاقبة القاصي منطقة مستعرضة الشرياني المتاحة للتدفق ، وتصلب الشرايين ومقاومة الداني في المنبع والمصب فمنها ، على التوالي. جميع النتائج التي تم الحصول عليها في عزلة ، وتهوية الرئتين perfused تكون مستقلة من المتعاطفين نغمة الجهاز العصبي ، والحالة حجم وآثار التخدير. وقد استخدمنا هذه التقنية لقياس أثر الصمات الرئوية المزمنة ونقص الأكسجين على المقاومة والممانعة ، والتفريق بين مواقع العمل (أي مقابل الداني القاصي) من وكلاء فعال في الأوعية والأمراض باستخدام التبعية ضغط Z C. وعلاوة على ذلك ، وعندما تستخدم هذه التقنيات مع الرئتين من سلالات من الفئران المعدلة وراثيا ، يمكن تحديد الآثار المترتبة على المستوى الجزيئي عيوب الأوعية الدموية الرئوية في الهيكل والوظيفة.
Protocol
Discussion
خطوات حاسمة في الجراحة
فمن الأهمية بمكان أن يتم أخذ الحذر عند قطع القفص الصدري بعيدا عن الرئتين. يجب أن تكون عرضة الرئتين تماما وغير مطروقة من قبل الأنسجة المحيطة بها ولكن ليس خلال التضخم التي تضررت خلال عملية العزل. ويمكن استخدام ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا البحث من المعاهد الوطنية للصحة منح R01HL086939 (NCC).
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1 ml syringe | Fisher Sci | 14-829-10F | ||
| 10 ml syringe | Fisher Sci | 14-823-2A | ||
| 60 ml syringe | Fisher Sci | 13-689-8 | ||
| RPMI with GLN 6/PK | Fisher Sci | MT10040CV | ||
| Bottle Top Filters | Fisher Sci | 09-761-57 | ||
| Ficoll PM 70 | Sigma-Aldrich | F2878-100g | ||
| Heparin | Sigma-Aldrich | |||
| Y27632 | Sigma-Aldrich | Y0503 | ||
| Angled Ball Iris scissors | Fine Science Tools | 14109-09 | ||
| Vannas Spring Scissors – 4mm Blades | Fine Science Tools | 15018-10 | ||
| Fine Iris Scissors – straight | Fine Science Tools | 14106-09 | ||
| Dumont #5/45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | ||
| Dumont Medical Biology Forceps | Fine Science Tools | 11254-20 | ||
| Lauda E100 ECO-line 003 | VWR | Comparable to Lauda-Brinkmann E-103, 62400-922 | ||
| IL-1 Isolated perfused mouse lung system | Harvard Apparatus | 739904 | ||
| Blood Pressure Transducer P75 for PLUGSYS Module | Harvard Apparatus | 730020 | ||
| TS410 Flow Modules | Transonic | TS410 | ||
| ME 4 PXN Precision PXN Inline Flowsensors | Transonic | ME 4 PXN | ||
| Cole-Parmer Multi-Syringe Pumps | Cole-Parmer | EW-74900-20 | ||
| Nembutal 50MG/ML 20ML Vial | Amatheon |
Referências
- Pace, J. Sympathetic control of pulmonary vascular impedance in anesthetized dogs. Circ Res. 29, 555-568 (1971).
- Ewalenko, P., Stefanidis, C., Holoye, A., Brimioulle, S., Naeije, R. Pulmonary vascular impedance vs. resistance in hypoxic and hyperoxic dogs: effects of propofol and isoflurane. J Appl Physiol. 74, 2188-2193 (1993).
- Nichols, W. W., O’Rourke, M. F., Hartley, C., McDonald, D. A. . McDonald’s blood flow in arteries : theoretical, experimental, and clinical principles. , (2005).
- Tuchscherer, H. A., Webster, E. B., Chesler, N. C. Pulmonary Vascular Resistance and Impedance in Isolated Mouse Lungs: Effects of Pulmonary Emboli. Annals of Biomedical Engineering. 34, 660-668 (2006).
- Tuchscherer, H. A., Vanderpool, R. R., Chesler, N. C. Pulmonary vascular remodeling in isolated mouse lungs: Effects on pulsatile pressure-flow relationships. Journal of Biomechanics. 40, 993-1001 (2007).
- Vanderpool, R., Naeije, R., Chesler, N. Impedance in Isolated Mouse Lungs for the Determination of Site of Action of Vasoactive Agents and Disease. Ann Biomed Eng. , (2010).
- Vanderpool, R., Kim, A., Molthen, R., Chesler, N. Effects of acute rho kinase inhibition on chronic hypoxia-induced changes in proximal and distal pulmonary arterial structure and function. Journal of Applied Physiology. , (2010).
- El-Bizri, N. Smooth muscle protein 22alpha-mediated patchy deletion of Bmpr1a impairs cardiac contractility but protects against pulmonary vascular remodeling. Circ Res. 102, 380-388 (2008).
- Champion, H., Michelakis, E., Hassoun, P. Comprehensive invasive and noninvasive approach to the right ventricle-pulmonary circulation unit: state of the art and clinical and research implications. Circulation. 120, 992-1007 (2009).
- Gan, C. Noninvasively assessed pulmonary artery stiffness predicts mortality in pulmonary arterial hypertension. Chest. 132, 1906-1912 (2007).
- Mahapatra, S., Nishimura, R., Sorajja, P., Cha, S., McGoon, M. Relationship of pulmonary arterial capacitance and mortality in idiopathic pulmonary arterial hypertension. J Am Coll Cardiol. 47, 799-803 (2006).
- Bogaard, H. Chronic pulmonary artery pressure elevation is insufficient to explain right heart failure. Circulation. 120, 1951-1960 (2009).
