पृथक, हवादार, और instrumented माउस फेफड़े की विशेषता काँपने के गुणवाला फ्लो के साथ perfused
Summary
निम्नलिखित प्रोटोकॉल अलग, ventilating और माउस फेफड़ों instrumenting स्थिर या काँपने के गुणवाला फेफड़े नाड़ी दबाव प्रवाह संबंधों को मापने के क्रम में रक्त प्रवाह, airflow, airway परिवर्तन सही निलय afterload पर और नाड़ी परिवर्तन के प्रभाव यों की प्रक्रिया की रूपरेखा.
Abstract
पृथक हवादार, और instrumented माउस फेफड़ों तैयारी स्थिर और काँपने के गुणवाला फेफड़े नाड़ी दबाव प्रवाह रिश्तों को फुफ्फुसीय धमनी प्रवाह दर, प्रवाह दर तरंग, airway दबाव और बाएं आलिंद दबाव पर स्वतंत्र नियंत्रण के साथ मापा जा करने की अनुमति देता है. पल्मोनरी संवहनी प्रतिरोध बहु बिंदु, स्थिर दबाव प्रवाह घटता पर आधारित गणना की है, फेफड़े संवहनी प्रतिबाधा काँपने के गुणवाला दबाव प्रवाह आवृत्तियों की एक रेंज में प्राप्त घटता से गणना की है. के रूप में अब नैदानिक मान्यता प्राप्त है, प्रतिबाधा प्रतिरोध की तुलना में सही निलय afterload का एक बेहतर उपाय है क्योंकि यह संवहनी अनुपालन के प्रभाव है, जो नगण्य नहीं कर रहे हैं विशेष रूप से फेफड़े के संचलन में शामिल हैं. प्रतिबाधा के तीन महत्वपूर्ण मैट्रिक्स – शून्य हर्ट्ज प्रतिबाधा 0 जेड, विशेषता प्रतिबाधा जेड सी, और लहर प्रतिबिंब आर डब्ल्यू के सूचकांक – बाहर का धमनी पार के अनुभागीय क्षेत्र प्रवाह के लिए उपलब्ध, प्रॉक्सिमल धमनी कठोरता और प्रतिबाधा अपस्ट्रीम बहाव में अंतर्दृष्टि प्रदान बेमेल, क्रमशः,. सभी पृथक में परिणाम प्राप्त, हवादार और perfused फेफड़ों सहानुभूति तंत्रिका तंत्र टोन, मात्रा स्थिति और संज्ञाहरण के प्रभाव से स्वतंत्र हैं. हम इस तकनीक का इस्तेमाल किया है फेफड़े emboli और प्रतिरोध और प्रतिबाधा पर जीर्ण hypoxia के प्रभाव यों और vasoactive एजेंटों और जेड सी के दबाव निर्भरता का उपयोग रोग की कार्रवाई की साइटों (यानी, प्रॉक्सिमल बनाम डिस्टल) के बीच अंतर. इसके अलावा, जब इन तकनीकों चूहों के अनुवांशिक इंजीनियर उपभेदों के फेफड़ों के साथ उपयोग किया जाता है, फेफड़े संवहनी संरचना और समारोह पर आणविक स्तर के दोष के प्रभाव को निर्धारित किया जा सकता है.
Protocol
Discussion
शल्य चिकित्सा में गंभीर कदम
यह महत्वपूर्ण है कि ध्यान जब फेफड़ों से रिब पिंजरे दूर काटने के लिए ले लिया है. फेफड़ों पूरी तरह से उजागर करना चाहिए आसपास के ऊतकों द्वारा uninhibited लेकिन मुद्रास्फीति ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध स्वास्थ्य अनुदान R01HL086939 (एनसीसी) के राष्ट्रीय संस्थानों द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1 ml syringe | Fisher Sci | 14-829-10F | ||
| 10 ml syringe | Fisher Sci | 14-823-2A | ||
| 60 ml syringe | Fisher Sci | 13-689-8 | ||
| RPMI with GLN 6/PK | Fisher Sci | MT10040CV | ||
| Bottle Top Filters | Fisher Sci | 09-761-57 | ||
| Ficoll PM 70 | Sigma-Aldrich | F2878-100g | ||
| Heparin | Sigma-Aldrich | |||
| Y27632 | Sigma-Aldrich | Y0503 | ||
| Angled Ball Iris scissors | Fine Science Tools | 14109-09 | ||
| Vannas Spring Scissors – 4mm Blades | Fine Science Tools | 15018-10 | ||
| Fine Iris Scissors – straight | Fine Science Tools | 14106-09 | ||
| Dumont #5/45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | ||
| Dumont Medical Biology Forceps | Fine Science Tools | 11254-20 | ||
| Lauda E100 ECO-line 003 | VWR | Comparable to Lauda-Brinkmann E-103, 62400-922 | ||
| IL-1 Isolated perfused mouse lung system | Harvard Apparatus | 739904 | ||
| Blood Pressure Transducer P75 for PLUGSYS Module | Harvard Apparatus | 730020 | ||
| TS410 Flow Modules | Transonic | TS410 | ||
| ME 4 PXN Precision PXN Inline Flowsensors | Transonic | ME 4 PXN | ||
| Cole-Parmer Multi-Syringe Pumps | Cole-Parmer | EW-74900-20 | ||
| Nembutal 50MG/ML 20ML Vial | Amatheon |
Referências
- Pace, J. Sympathetic control of pulmonary vascular impedance in anesthetized dogs. Circ Res. 29, 555-568 (1971).
- Ewalenko, P., Stefanidis, C., Holoye, A., Brimioulle, S., Naeije, R. Pulmonary vascular impedance vs. resistance in hypoxic and hyperoxic dogs: effects of propofol and isoflurane. J Appl Physiol. 74, 2188-2193 (1993).
- Nichols, W. W., O’Rourke, M. F., Hartley, C., McDonald, D. A. . McDonald’s blood flow in arteries : theoretical, experimental, and clinical principles. , (2005).
- Tuchscherer, H. A., Webster, E. B., Chesler, N. C. Pulmonary Vascular Resistance and Impedance in Isolated Mouse Lungs: Effects of Pulmonary Emboli. Annals of Biomedical Engineering. 34, 660-668 (2006).
- Tuchscherer, H. A., Vanderpool, R. R., Chesler, N. C. Pulmonary vascular remodeling in isolated mouse lungs: Effects on pulsatile pressure-flow relationships. Journal of Biomechanics. 40, 993-1001 (2007).
- Vanderpool, R., Naeije, R., Chesler, N. Impedance in Isolated Mouse Lungs for the Determination of Site of Action of Vasoactive Agents and Disease. Ann Biomed Eng. , (2010).
- Vanderpool, R., Kim, A., Molthen, R., Chesler, N. Effects of acute rho kinase inhibition on chronic hypoxia-induced changes in proximal and distal pulmonary arterial structure and function. Journal of Applied Physiology. , (2010).
- El-Bizri, N. Smooth muscle protein 22alpha-mediated patchy deletion of Bmpr1a impairs cardiac contractility but protects against pulmonary vascular remodeling. Circ Res. 102, 380-388 (2008).
- Champion, H., Michelakis, E., Hassoun, P. Comprehensive invasive and noninvasive approach to the right ventricle-pulmonary circulation unit: state of the art and clinical and research implications. Circulation. 120, 992-1007 (2009).
- Gan, C. Noninvasively assessed pulmonary artery stiffness predicts mortality in pulmonary arterial hypertension. Chest. 132, 1906-1912 (2007).
- Mahapatra, S., Nishimura, R., Sorajja, P., Cha, S., McGoon, M. Relationship of pulmonary arterial capacitance and mortality in idiopathic pulmonary arterial hypertension. J Am Coll Cardiol. 47, 799-803 (2006).
- Bogaard, H. Chronic pulmonary artery pressure elevation is insufficient to explain right heart failure. Circulation. 120, 1951-1960 (2009).
