Um método de transferência de genes para o tratamento da insuficiência cardíaca isquêmica é descrito usando um modelo de suínos de infarto do miocárdio. Nosso método simples e reprodutível nos permite facilmente avaliar a eficácia da transferência de genes diferentes com uma maneira muito simples e reprodutível.
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Artigo de método
Transferência de genes para insuficiência cardíaca isquêmica em um modelo pré-clínica
Neste artigo
Resumo
Resumo
Várias tecnologias emergentes estão sendo desenvolvidos para pacientes com insuficiência cardíaca. Bem estabelecida avaliações pré-clínicos são necessários para determinar sua eficácia e segurança.
Terapia gênica usando vetores virais é uma das abordagens mais promissoras para o tratamento de doenças cardíacas. Entrega de vários genes virais diferentes, alterando o gene transportador tem potencial terapêutico imensurável.
Neste vídeo, o processo completo de um modelo animal de criação de insuficiência cardíaca seguida de transferência de genes é apresentado através de um modelo suína. Primeiro, infarto do miocárdio é criado por oclusão da descendente anterior proximal da artéria coronária. Coração resultados remodelação na insuficiência cardíaca crônica. Exclusivo para o nosso modelo é uma cicatriz bastante grande que reflete verdadeiramente pacientes com insuficiência cardíaca grave que necessitam de terapia agressiva para resultados positivos. Após a criação infarto do miocárdio eo desenvolvimento de tecido cicatricial, uma injeção intracoronariana de vírus é demonstrado com a infusão de nitroglicerina simultânea. Nosso método de injeção proporciona a transferência de genes simples e eficiente, com reforço da expressão genética. Esta combinação de um modelo de infarto do miocárdio suína com entrega vírus intracoronário tem provado ser uma metodologia consistente e reprodutível, o que contribui não só para testar o efeito do gene individual, mas também comparar a eficácia de muitos genes como candidatos terapêuticos.
Protocolo
1. Infarto do miocárdio criação
- Porcas Yorkshire (20 kg) de animais Biotech Industries (Doylestown, PA) são pré-medicados com Telazol (tiletamina / zolazepam) (8,0 mg / kg) e buprenorfina (0,6 mg).
- Os animais são intubados e ventilados com oxigênio a 100%. Anestesia geral é mantida com propofol (5-8mg/kg/hr) durante todo o procedimento.
- O site femoral é preparada com 70% de álcool isopropílico seguido de iodopovidona. A punção percutânea fornece acesso à artéria e para colocação do introdutor. Após a inserção da bainha, 3000-5000 UI de heparina é administrada IV para manter um tempo de coagulação ativado de 250-300 segundos.
- U....
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Discussão
Entre as várias causas de insuficiência cardíaca, isquemia é de longe o mais freqüente na etiologia. Para superar esta grave doença, várias abordagens terapêuticas estão sendo desenvolvidas. Avaliações mais criteriosas de terapias são necessárias antes que essas terapias promissoras estão podem ser aplicados para as clínicas. Portanto, o estabelecimento de um modelo de insuficiência cardíaca isquêmica que representa as condições clínicas dos pacientes é fundamental para o desenvolvimento de terapias insuficiência cardía.......
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Divulgações
Todos os autores não têm associações comerciais que podem se apresentar como um conflito de interesses em conexão com o manuscrito.
Agradecimentos
Este trabalho é apoiado pela Fundação Leducq através da rede Caerus (rjh), pelo NIH R01 HL093183, HL088434, HL071763, HL080498, HL083156 e P20HL100396 (rjh). DL foi apoiada pela Fundação Alemã de Pesquisa. Gostaríamos de agradecer a Lauren Leonardson por sua assistência técnica neste projeto.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Telazol | Fort Dodge Animal Health | 0856-9050-49 | |
| Propofol | APP Pharmaceuticals | 63323-270-20 | |
| Heparina | APP Pharmaceuticals | 63323-540-11 | |
| Amiodarona | APP Pharmaceuticals | 63323-616-03 | |
| Sulfato de atropina | Med-Pharmex | 54925-063-10 | |
| Acetato de potássio | American Regent Inc. | 2053-25 | |
| Nitroglicerina | American Regent Inc. | 4810-25 | |
| Salix (Furosemida) | Intervet Inc. | 710461 | |
| Cateter tipo taco de hóquei 5 Fr | Cordis | 556-278-0L | |
| Cateter tipo taco de hóquei 7 Fr | Cordis | 778-278-00 | |
| Fio guia coronariano | Abbott Laboratories | 1044588 | |
| Balão coronariano | Abbott Laboratories | 1009447-08 | |
| Bainha 8Fr | Terumo Medical Corp. | RSS801 |
Referências
- Perez de Prado, A. Closed-chest experimental porcine model of acute myocardial infarction-reperfusion. J Pharmacol Toxicol Methods. 60, 301-306 (2009).
- Angeli, F. S. Left ventricular remodeling after myocardi....
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Reimpressões e permissões
