磁気共鳴イメージングのための準備、精製、および造影剤として使用するための希土類錯体のキャラクタリゼーション
Summary
我々は、メタル化、精製、及びランタニド錯体の特性を示しています。ここで説明する複合体は、磁気共鳴イメージング法を用いて、これらの分子のトラッキングを有効に高分子に結合させることができる。
Abstract
Polyaminopolycarboxylateベースのリガンドは、一般的にランタニドイオンをキレートするために使用され、結果として得られる複合体は、磁気共鳴画像（MRI）用造影剤として有用である。多くの市販のリガンドは、アミン反応性の活性エステルとイソチオシアネート基又はチオール反応性マレイミドを介して高分子と生体分子への彼らは、高速、高純度を可能にする官能基を含んでいるために特に有用であり、かつ高収率共役。これらのリガンドのメタル化は、コンジュゲーション化学、メタル化の手順の微妙な違いの分野における一般的な知識と考えている間に金属の出発物質を選択する際に考慮する必要があります。さらに、精製および特性評価のための複数のオプションが存在し、最も効果的な手順の選択は、部分的に出発原料の選択に依存します。これらの微妙な違いは、多くの場合、パブリッシュしたプロトコルでは無視されています。ここで、私たちの目標は、メタル化、精製、およびMRI（図1）のための造影剤として使用することができるランタニド錯体の特性評価のための一般的な方法を示すことです。我々は、この出版物は、生物医学科学者は、出発原料と精製方法の選択を緩和し、一般的に使用される反応の彼らのレパートリーにランタニド錯体形成反応を組み込むことが可能になることを期待しています。
Protocol
1。 LnCl 3塩を使用してメタル化 30から265 mMの溶液を生成する水の配位子を溶かす。配位子2 – （4 – isothiocyanatobenzyl） -ジエチレントリアミン五酢酸（P – SCN – BN – DTPA）は73 mMの濃度で、このビデオで使用されていました。 1 M NH 4 OHを添加することにより5.5と7.0の間に配位子の溶液のpHを調整します。このビデオでは、1 M NH 4 OH液0.2 mLを使用した。 <…
Discussion
ランタニド系造影剤4-14を含んで出版物の増加を考えると、それはケアが、準備、精製、および再現性と比較可能な結果を確保するために製品の特性で撮影されていることが重要です。これらの複合体は、しばしば精製し、その常磁性の性質とバイオコンジュゲーションのために使用される可能性のある官能基の感受性に起因する有機分子の相対的な特徴づけるために挑戦と考えられ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々は感謝してウェイン州立大学（MJA）、研究（SMV）のエージングのためのアメリカ財団、国立研究所の生体イメージングとバイオの国立研究所から独立キャリアトランジション賞（R00EB007129）への経路からの助成金からのスタートアップ資金を認めるの健康（MJA）。
Materials
| Reagents and Equipment | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| EuCl3•6H2O | Sigma-Aldrich | 203254-5G |
| p-SCN-Bn-DTPA | Macrocyclics | B-305 |
| ammonium hydroxide | EMD | AX1303-3 |
| Spectra/Por Biotech Cellulose Ester (CE) Dialysis Membrane – 500 D MWCO | Fisher Scientific | 68-671-24 |
| Millipore IC Millex-LG Filter Units | Fisher Scientific | SLLG C13 NL |
| xylenol orange tetrasodium salt | Alfa Aesar | 41379 |
| acetic acid | Fluka | 49199 |
| D2O | Cambridge Isotope Laboratories, Inc. | DLM-4-25 |
| water purifier | ELGA | Purelab Ultra |
| high performance liquid chromatography and mass spectrometry | Shimadzu | LCMS-2010EV |
| relaxation time analyzer | Bruker | mq60 minispec |
| UV-vis spectrophotometer | Fisher Scientific | 20-624-00092 |
| freeze dryer | Fisher Scientific | 10-030-133 |
| pH meter | Hanna Instruments | HI 221 |
| spectrofluorometer | HORIBA Jobin Yvon | Fluoromax-4 |
| Molecular Weight Calculator version 6.46 by Matthew Monroe, downloaded October 17, 2009 | http://ncrr.pnl.gov/software/ | Molecular Weight Calculator |
Referências
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Citar este artigo
Averill, D. J., Garcia, J., Siriwardena-Mahanama, B. N., Vithanarachchi, S. M., Allen, M. J. Preparation, Purification, and Characterization of Lanthanide Complexes for Use as Contrast Agents for Magnetic Resonance Imaging. J. Vis. Exp. (53), e2844, doi:10.3791/2844 (2011).