초음파 타겟 Microbubble 파괴 기술 소개
Summary
초음파 타겟 Microbubble의 파괴 (UTMD)가 같은 마음으로 간 초음파 검사에 액세스할 수 기관을 대상으로, 치료 유전자를 포함 bioactive 분자의 특정 사이트 게재를 직접하는 데 사용할 수 있습니다<sup> 1-6</sup>.
Abstract
이러한 관심의 유전자를 인코딩 부정 청구 플라스미드 DNA를 벡터로 UTMD, bioactive 분자에서, 지질 microbubble 대비 요원 7-9의 양이온 포탄에 추가됩니다. 생쥐에서 이러한 벡터 운반 microbubbles는 심장의 좌심실 자에게하거나 직접 관리하실 수 있습니다. 큰 동물에 그들은 또한 카테터를 통해 주입 intracoronary 수 있습니다. 순환에서 대상 기관에 대한 후속 배달 microbubbles의 공진 주파수에서 음향 캐비테이션에 의해 발생합니다. 그것은 기계적 에너지 또는 대상 지역 10 microvasculature의 내피 세포 사이의 과도 기공 형성에 microbubble 파괴 결과에 의해 생성되는 가능성이 보인다. 이 sonoporation 효과의 결과로로와 내피 세포에 걸쳐 transfection 효율이 향상되며, transgene 인코딩 벡터는 주변 조직으로 입금됩니다. 순환에 남아 플라스미드 DNA는 신속하게 추가로 이외의 sonicated 조직에 전달 가능성을 감소하고 매우 구체적인 목표 – 장기 transfection로 연결 혈액에 nucleases로 저하됩니다.
Protocol
Discussion
UTMD은 유전자 전달에 대한 새로운 접근 방식을 나타냅니다. 플랫폼 기술로 그것은 조직 특이성의 높은 수준을 원하는 것입니다 bioactive 분자의 무수한를 제공하기 위해, 많은 잠재적인 유전자 치료 전략의 결합 수 있습니다. 기술의 주요 생물 학적 한계는 transfection의 낮은 효율성이다. 또 다른 중요한 고려 사항은 현저하게 뼈 또는 공기를 개입 감소 수있는 초음파 검사로 대상 기관의 접근이다. ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
그랜트 지원 NHLBI HL080532, NHLBI HL073449, NCRR RR16453, 그리고 그랜트 -에 도움이 수상 (RVS)를 AHA 국가를 포함하고 있습니다. 특별 감사는 비디오 제작과 함께 자신의 지원 거리 코스 설계 및 컨설팅 (DCDC) 그룹 dcdcgroup.org,하고 DCDC를 설립 교육 부여 번호 P336C050047 미국 이민국에 연장됩니다.
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine | Sigma-Aldrich | P-5911 | component of the microbubble lipid shell |
| 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine | Sigma-Aldrich | P-3275 | component of the microbubble lipid shell |
| glucose | Sigma-Aldrich | G5400 | thought to stabilize the microbubbles |
| phosphate-buffered saline | Sigma-Aldrich | P5368 | |
| glycerol | Sigma-Aldrich | G5516 | believed to prevent microbubbles from coalescing |
| Octafluoropropane gas | AirGas | N/A | inert gas used in clinical applications |
| VialMix dental amalgamator | Bristol-Myers Squibb | N/A | |
| 1 MHz, 13mm, unfocused transducer | Olympus | A303S-SU | |
| 20 MHz Function/Arbitrary Waveform Generator | Agilent | 33220A | |
| Power Amplifier | Krohn-Hite Co. | Model 7500 | |
| Hydrophone | Bruel and Kjaer | Type 1803 | |
| Charge Amplifier | Bruel and Kjaer | Type 2634 | |
| 500 MHz Oscilloscope | LeCroy | 9354L | |
| VisualSonics’ Vevo 2100 Imaging System with 34 MHz transducer | VisualSonics | 2100 | |
| 27G one inch tail vein catheters | VisualSonics | N/A | |
| Genie Plus infusion pump | Kent Scientific | GENIE |
Referências
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